定点整合人Bcl-2基因的CHO／dhfr^-细胞株的建立

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：goodsky4008

【摘要】

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构建重组载体质粒pMCEfrt-Bcl-2,利用FIp-InTM定点重组系统,在CHO-dhfr-细胞内定点整合人Bcl-2基因,通过Western印迹检测重组细胞Bcl-2蛋白的表达.通过流式细胞仪和DNA Ladde

【作者】

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许凌峰刘志刚孙志伟林建波杜韫刘姗俞炜源

【机构】

：

军事医学科学院

【出处】

：

生物技术通讯

【发表日期】

：

2005年6期

【关键词】

：

CHO/dhfr^-细胞 BCL-2基因细胞培养凋亡 CHO-dhfr cell Bcl-2 gene mammalian cell culture

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构建重组载体质粒pMCEfrt-Bcl-2,利用FIp-InTM定点重组系统,在CHO-dhfr-细胞内定点整合人Bcl-2基因,通过Western印迹检测重组细胞Bcl-2蛋白的表达.通过流式细胞仪和DNA Ladder检测在高NH4Cl条件下细胞的凋亡情况;用台盼蓝染色检测在无血清IMDM培养基中细胞的活细胞数目和活细胞比例.结果获得了稳定表达Bcl-2基因的细胞株CHO-Bcl-2,该细胞株能高水平表达Bcl-2蛋白.在无血清培养过程中,CHO-Bcl-2细胞比对照细胞保持高约15%的活细胞比例,细

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