【摘 要】
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将一种源于假单胞菌的目的基因克隆到表达载体pET-22b(+),构建重组质粒pET-22b(+)-tao,并转入到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达。获得的E.coli BL21(DE3)(tao)于37℃培养70-90 m
【机 构】
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江南大学生物工程学院,厦门欧米克生物科技有限公司
【基金项目】
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国家自然科学基金(21604032),“十二五”农村领域国家科技计划课题(2015BAD15B04),中央高校基本科研业务费专项资金资助(JUSRP116031),江南大学工业生物技术教育部重点实验室开放课题(KLIB-KF201501)
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将一种源于假单胞菌的目的基因克隆到表达载体pET-22b(+),构建重组质粒pET-22b(+)-tao,并转入到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达。获得的E.coli BL21(DE3)(tao)于37℃培养70-90 min后,加入终浓度为0.4 mmol/L的异丙荃硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG),20℃诱导6 h,黄素单加氧酶(trans-anethole oxygenase,TAO)酶活可达35 U/g。在pH值为8、反应温度
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