【摘 要】
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为获得高产、优质的六妹羊肚菌原生质体，以其菌丝为试验材料，运用单因素试验和响应面优化试验，探究原生质体的最佳制备条件。以原生质体产量为考察指标，根据酶解时间、酶质量分数、酶解温度和稳渗剂种类4个单因素的试验结果，运用Box-Behnken设计响应面优化试验，结果表明，在酶解时间3.23 h、酶质量分数2.28%、酶解温度30.26℃条件下，以甘露醇为稳渗剂，六妹羊肚菌原生质体产量可达5.07×10
【基金项目】
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辽宁省“兴辽英才计划”项目“农业微生物资源开发与应用”（XLYC2002048）； 辽宁省“揭榜挂帅”科技攻关专项计划项目“食用菌工厂化产业技术创新及资源综合利用技术”（2021JH1/10400035）；
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为获得高产、优质的六妹羊肚菌原生质体，以其菌丝为试验材料，运用单因素试验和响应面优化试验，探究原生质体的最佳制备条件。以原生质体产量为考察指标，根据酶解时间、酶质量分数、酶解温度和稳渗剂种类4个单因素的试验结果，运用Box-Behnken设计响应面优化试验，结果表明，在酶解时间3.23 h、酶质量分数2.28%、酶解温度30.26℃条件下，以甘露醇为稳渗剂，六妹羊肚菌原生质体产量可达5.07×10~5个/mL,验证试验（实际试验选取酶解时间、酶质量分数、酶解温度分别为3.2 h、2.3%、30℃）所得原生质体产量为（5.13±0.13）×10~5个/mL,两者差异不显著。对于六妹羊肚菌原生质体的制备，各因素的影响程度：酶解时间＞酶质量分数＞酶解温度，酶质量分数与酶解温度的交互作用有极显著影响（P＜0.01）,酶解时间与酶解温度的交互作用有显著影响（P＜0.05）。
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