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丙型肝炎病毒C端截短21个氨基酸NS5B蛋白的克隆、表达及鉴定

来源 :药物生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaofeidong

【摘 要】

：

构建HCVc端截短21个氨基酸的NS5B（HCVNS5B-C21）的重组原核表达质粒，并获得HCVNS5B-C21蛋白，为以其为靶位的抗HCV药物筛选等创造条件。利用PCR技术扩增HCVNS5B-C21基因，BamHI和XhoI

【作 者】

：

杨华凤 潘明洁 吕敏 李越希 

【机 构】

：

南京医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系,南京军区军事医学研究所

【出 处】

：

药物生物技术

【发表日期】

：

2008年2期

【关键词】

：

丙型肝炎病毒 非结构区5B蛋白 RNA依赖的RNA聚合酶 克隆 表达 Hepatitis C virus （HCV）  Non-structural 5B pr 

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构建HCVc端截短21个氨基酸的NS5B（HCVNS5B-C21）的重组原核表达质粒，并获得HCVNS5B-C21蛋白，为以其为靶位的抗HCV药物筛选等创造条件。利用PCR技术扩增HCVNS5B-C21基因，BamHI和XhoI双酶酶切后连接到经同样酶酶切的原核表达载体pET-28a（＋）上，转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株，获得阳性重组质粒pET-28a（＋）-NS5B-C21，IPTG诱导表达，亲和层析法纯化目的蛋白表达产物经SDS-PAGE进行鉴定。成功构建了HCVNS5B蛋白表达载体pET-28

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