目的　以绿色荧光蛋白 (GFP)为报告基因优化悬浮培养的白血病细胞的电穿孔转染条件。方法　通过控制电压、电容、细胞状态、温度及缓冲液等转染条件 ,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒GFP转入悬浮培养的人白血病细胞株K5 6 2和NB4 ,用流式细胞仪和荧光显微镜观察转染率。结果　 ( 1)低电压、高电容能高效转染悬浮培养的人白血病细胞 ,细胞类型不同条件有所差异 ,K5 6 2细胞在 2 5 0V、95 0 μF得到最大转染率 4 0 .6 % ,NB4细胞在 35 0V、95 0 μF得到最大转染率 32 .9%。 ( 2 )良好的细胞生长状态能明显提高转染率。 ( 3)温度和缓冲液中的血清成分对电穿孔效率影响不大。结论　电穿孔是一种高效的基因转染法 ,通过优化其条件 ,可提高转染率。