补肾益气活血方及其单味药对人牙周膜干细胞增殖分化的影响

来源 :现代生物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiukaifeng
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目的:探讨自拟补肾益气活血方及其单味药当归、补骨脂对体外培养的人牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖和相关成骨基因表达的影响.方法:分离培养得到hPDLSCs,选取第3代hPDLSCs,细胞增殖试剂盒(CCK-8)检测不同浓度(0g/mL、1×10-7g/mL、1×10-5g/mL、1×10-3g/mL)补肾益气活血方和当归、补骨脂对hPDLSCs增殖的影响,并确定最佳作用浓度和最佳作用时间;通过定量聚合酶链式反应(qPCR)检测Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)相关成骨基因的表达水平,通过茜素红染色观察细胞成骨分化情况.结果:与0 g/mL相比,补肾益气活血方各浓度在第一天和第三天时均能显著促进细胞增殖(P<0.05),且浓度为1×10-5g/mL在第三天、第五天时效果均最为显著(P<0.05);当归同样在浓度为1×10-5g/mL、第三天及第五天时效果均最为显著(P<0.05);补骨脂则仅在第一天时能显著促进细胞增殖(P<0.05).与空白对照组比较,1×10-5 g/mL的补肾益气活血方、当归、补骨脂均能显著提升成骨相关Runx2、OCN、OPN、ALP的表达(P<0.05),且补肾益气活血方的上调效果最为显著.茜素红染色检测显示,补肾益气活血方可增加矿化结节,促进作用最为显著.结论:补肾益气活血方可促进hPDLSCs的增殖和骨向分化,在治疗慢性牙周炎中有望发挥更大作用.
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