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目的:克隆人膀胱逼尿肌中肾上腺素能β3受体基因全长,并构建其反义真核表达载体.方法:采用RT—PCR法从人膀胱逼尿肌中扩增出β3-AR的全长cDNA序列,上游引物5’端加有BamHI及ClaⅠ酶切位点,下游引物加有HindⅢ酶切位点,将该片段插入pUC18载体中,摇菌扩增后,用ClaⅠ和HindⅢ切下目的基因,然后将目的片段反向插入逆转录病毒表达载体pLNCX上.最后对产生的重组子进行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定.结果:经琼脂糖凝胶鉴定,所克隆的目的基因大约为1.2kb,并成功地连接到逆转录病毒载体pLNCX