siRNA沉默E2F3基因对人膀胱癌细胞的增殖抑制作用

来源 :吉林大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:zmhao
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目的:探讨siRNA干扰E2F3基因对膀胱癌细胞(5637细胞)增殖的抑制作用,阐明E2F3基因沉默对5637细胞增殖抑制作用的生物学机制。方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F3基因的寡核苷酸链,经BamHⅠ、HindⅢ双酶切克隆至pRNAT-U6.1/Neo系统,重组构建E2F3siRNA的RNAi质粒,以质粒转染DH5α菌株筛选得到稳定表达siRNA的细胞,转染5637细胞E2F3基因沉默,RT-PCR及Western blotting检测E2F3表达,流式细胞术检测5637细胞周期,
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