用变性高压液相色谱技术检测耐氧氟沙星的结核分枝杆菌临床株

来源 :结核病与胸部肿瘤 | 被引量 : 0次 | 上传用户:neverneverland
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目的利用变性高压液相色谱(DHPLC)技术快速检测结核分枝杆菌gyrA基因的突变,从而对结核分枝杆菌是否耐受氟喹诺酮类药物做出初步判断。方法提取试验菌株基因组DNA,扩增gyrA基因的氟喹诺酮药物耐受决定区(QRDR)核酸片段;分别与H37Rv标准株(或者含有单纯Ser284突变的临床分离株作为标准)的相应PCR产物混合、杂交后,利用WAVE核苷酸片段分析系统对各杂交产物进行DHPLC检测;序列测定结果与相应的DHPLC检测结果进行比较以验证DHPLC检测的准确性。采用2mg/L的药物浓度进行氧氟沙星(O
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