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摘要：高效液相色谱法也称为高效液相色谱，它是色谱法的一个重要分支，也是在经典液相色谱法的基础上于近几十年来发展起来的。人们的生活水平日益提高，对食品的质量要求也越来越高，那么就需要高效液相色谱法发挥作用。高效液相色谱法在食品安全检测中具有重要作用，得到了广泛应用。本文就高效液相色谱技术在食品检测中的应用进行探讨。
关键词：高效液相色谱技术；食品检测；实际应用
1、高效液相色谱技术在食品检测中的应用
1.1在维生素检测中的应用
维生素是人体必需的营养物质，是一系列有机化合物的总称，对人体正常发展有着至关重要的作用。以往的维生素检测，一般都是先将样品取出，之后再进行检测，但在维生素提取及检测这两个环节中，维生素容易发生变化，影响检测结果的准确性。而高效液相色谱法具有很强的抗干扰性，在检测食品中维生素含量时，不仅可以提高检测效率，还能够保障检测准确性。
2.2在糖类检测中的应用
随着人们健康意识日益增强，过多摄入蔗糖有可能会导致肥胖、龋齿、糖尿病等疾病已成共识，因此对于糖的准确定量极为迫切。对此，可通过高效液相色谱法有效将食品中的糖分含量分离出来。一般来说，在对食品中糖类进行检测的过程中，受到糖类容易融化这个特点的影响，检测结果准确性很难把握。糖的检测方法有很多种，如物理法、化学法、色谱法等。高效液相色谱法，其固定相以液体或者固体颗粒为主，检测的时间比较短，并且具有较高的抗干扰性，因此，检测结果更加准确、科学。
1.3在添加剂检测中的应用
1.3.1检测甜味剂
在检测防腐剂的过程中，主要是运用高效液相色谱技术检测其中的甜菊苷和糖精钠以及安赛蜜等是否符合国家规定的标准。但在实际检测的过程中，要重点运用 C18 的色谱柱和阴离子的交换柱，才能保证检测度比较高。
1.3.2检测防腐剂
综合实际情况来说，过多食用防腐剂会对人体造成严重的伤害，但在现阶段，很多容易变质的产品都会添加防腐剂，以延长食品的货架期。要想保证食品中添加的防腐剂的符合标准，就要运用高效液相色谱技术进行检测。在实际检测的过程中，需要格外注意食品中的丙酯和脱氨乙酸以及 BA 等多种物质是否超标。
1.3.3检测色素
目前，我国大多数生产商在制作食品的过程中，其中添加的色素多是通过人工合成的。运用高效液相色谱 -UVD 的方法进行检验，并且通过C18 柱的分离，可以准确迅速地检测。
1.4在有毒物质检测中的应用
1.4.1检测兽药残留
兽药残留現象主要发生在动物身上，一般是给动物注射药物之后，再将动物肉做成食品，最终就出现兽药残留现象。所以，就必须要对兽药残留中的抗菌素和抗生素以及杀虫剂等进行检测，从而保证食品的安全和质量。要合理运用 HPLC 荧光测定的技术方法进行检测，在对陆地动物中兽药残留进行检测的同时，还能对水生动物中的兽药残留进行准确检测。
1.4.2检测农药残留
人们为了提高农作物的产量，就大量运用化学农药，而食品中存在的农药会对人体的健康造成巨大的伤害。所以，需要进行严格检测。但食品中存在的农药都是有机化合物，产生的分子量较大且不稳定。所以，想要更好地保证食品的安全，就需要运用高效液相色谱技术进行检测。
2、高效液相色谱技术在食品检测中的实际例证
以食品中常用防腐剂检测为例，对高效液相色谱法的实际应用进行分析。目前，常用食品防腐剂为苯甲酸、山梨酸，其对霉菌、酵母的抗菌性强，在pH 4～8有良好的抗菌效果，在酱油、醋中也被作为防腐剂使用。本次运用高效液相色谱同时测定酱油、醋、饮料中的苯甲酸和山梨酸、对羟基苯甲酸酯类（乙酯和丙酯）。
2.1试剂
苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯，标准品，纯度≥ 98%，由中国标准技术开发公司标样开发部提供；超纯水；甲醇，色谱纯；乙酸铵水溶液，0.02 mol/L；氢氧化钠溶液，1.0 mol/L；
亚铁氰化钾溶液，100 g/L；乙酸锌溶液，200 g/L。所有试剂除了注明外均为分析纯。
2.2分析方法
色谱条件：VP-ODS，4.6 mm（i.d）×250 mm 色谱柱，流速1.0 mL/min，柱温为室温，流动相为甲醇-0.02 mol/L乙酸铵，检测波长程序0～4.3 min，230 nm以及4.3～6.2 min，254 nm。进样体积 20 μL。
2.3结果与讨论
2.3.1色谱条件的选择
2.3.1.1检测波长的选择
在 200 ～ 300 nm，使用二极管阵列检测器，对 4种防腐剂进行扫描，紫外光谱上获得最佳检测波长。苯甲酸、山梨酸的最大吸收在 230 nm 左右，羟基苯甲酸酯的最大吸收在 254 nm 左右，根据每组的出峰顺序，分别在不同的时间，对各组最佳吸收波长进行检测，4 种防腐剂检测灵敏度高、检测干扰少，能够满足实验要求。
2.3.1.2流动相及流速的选择
实验采用甲醇-0.02mol/L乙酸铵和甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾水溶液两种体系检测4种防腐剂，结果显示以甲醇 -0.02 mol/L 乙酸铵水溶液体系 4 种防腐剂的分离效果和容量因子比较合适。由于4种防腐剂极性具有较大差异，如果想要同时完全分离，则需要采取梯度洗脱，时间 0.01 min 时，甲醇含量 20%；时间 4.00 min时， 甲 醇 含 量 40%； 时 间 6.00 min 时， 甲 醇 含 量65%；流速为 1.0 mL/min 时，分离效果良好。在该色谱条件下得到色谱图，如图 1 所示。 2.3.2样品前处理条件的选择
在前处理环节，首先对酱油、醋进行稀释，之后分别采用乙酸锌 - 亚铁氰化钾溶液和醋酸铅 - 硫酸钠溶液 2 组沉淀剂进行试验，结果显示，具有较高蛋白质的酱油样品，使用乙酸锌 - 亚铁氰化钾溶液各 5.0 mL沉淀蛋白质，能够达到较好地避免样品蛋白质与胶体影响的效果。这种方法既便捷又快速，回收率良好。
2.3.3线性关系和检测限
在选定的色谱条件下，按配制好的标准系列进行实验，苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯的质量浓度在 0 ～ 200 mg/L 其浓度与峰面积成正比，线性相关系数均达 0.999（n=3），。苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯拟定的方法检测均为 0.5 mg/kg，可满足检测要求。
2.3.4回收率试验
在没有加入防腐剂的样品种，分别加入一定量的标准溶液 X，依据 2.3.2 进行处理，在最佳色谱条件下进行质量浓度测定，每个质量进行 3 测浓度测试，其回收率与精密度见表 1。
2.4实际样品测试
对市售的饮料、酱油、醋抽样检测，按照上述方法进行苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯的测定，每个样品平行测3次，结果见表2。
2.5 讨论
本次实验主要是针对酱油、醋、饮料种的常用防腐剂进行测定，包括醋中苯甲酸、山梨酸，对羟基苯甲酸酯等。在样品处理上，过程简单，分析结果准确、灵敏度高，符合实际工作需求，在酱油、醋、饮料等产品的卫生质量检测中应用，能够获得满意效果。
3、结语
随着我国经济不断发展，人们的生活水平日益提高，对于食品的检测越来越重视。对此，要推广使用高效液相色谱技术，让食品安全检测人员严格控制食品质量。另外，应加强研究，进一步提高高效液相色谱技术水平，弥补其中存在的一些漏洞，充分发挥其应有的价值，为人们的健康和生命安全提供保障。
参考文献：
[1] 苗述 . 高效液相色谱技术在食品检测中的应用 [J].黑龙江科技信息，2015（4）：39.
[2] 刘先德 . 高效液相色譜在食品质量检测中的应用 [J].中国高新技术企业，2015（18）：50-52.
[3] 阳艳娟 . 高效液相色谱技术在食品检测中的应用 [J].食品安全导刊，2015（20）：74-75.
[4] 田富饶，王旭强，叶旭炎，等 . 高效液相色谱法检测红酒中的苯甲酸和山梨酸 [J]. 现代科学仪器，2015（2）：99-101.
（作者单位：河南省口岸食品检验检测所）
关键词：高效液相色谱技术；食品检测；实际应用
1、高效液相色谱技术在食品检测中的应用
1.1在维生素检测中的应用
维生素是人体必需的营养物质，是一系列有机化合物的总称，对人体正常发展有着至关重要的作用。以往的维生素检测，一般都是先将样品取出，之后再进行检测，但在维生素提取及检测这两个环节中，维生素容易发生变化，影响检测结果的准确性。而高效液相色谱法具有很强的抗干扰性，在检测食品中维生素含量时，不仅可以提高检测效率，还能够保障检测准确性。
2.2在糖类检测中的应用
随着人们健康意识日益增强，过多摄入蔗糖有可能会导致肥胖、龋齿、糖尿病等疾病已成共识，因此对于糖的准确定量极为迫切。对此，可通过高效液相色谱法有效将食品中的糖分含量分离出来。一般来说，在对食品中糖类进行检测的过程中，受到糖类容易融化这个特点的影响，检测结果准确性很难把握。糖的检测方法有很多种，如物理法、化学法、色谱法等。高效液相色谱法，其固定相以液体或者固体颗粒为主，检测的时间比较短，并且具有较高的抗干扰性，因此，检测结果更加准确、科学。
1.3在添加剂检测中的应用
1.3.1检测甜味剂
在检测防腐剂的过程中，主要是运用高效液相色谱技术检测其中的甜菊苷和糖精钠以及安赛蜜等是否符合国家规定的标准。但在实际检测的过程中，要重点运用 C18 的色谱柱和阴离子的交换柱，才能保证检测度比较高。
1.3.2检测防腐剂
综合实际情况来说，过多食用防腐剂会对人体造成严重的伤害，但在现阶段，很多容易变质的产品都会添加防腐剂，以延长食品的货架期。要想保证食品中添加的防腐剂的符合标准，就要运用高效液相色谱技术进行检测。在实际检测的过程中，需要格外注意食品中的丙酯和脱氨乙酸以及 BA 等多种物质是否超标。
1.3.3检测色素
目前，我国大多数生产商在制作食品的过程中，其中添加的色素多是通过人工合成的。运用高效液相色谱 -UVD 的方法进行检验，并且通过C18 柱的分离，可以准确迅速地检测。
1.4在有毒物质检测中的应用
1.4.1检测兽药残留
兽药残留現象主要发生在动物身上，一般是给动物注射药物之后，再将动物肉做成食品，最终就出现兽药残留现象。所以，就必须要对兽药残留中的抗菌素和抗生素以及杀虫剂等进行检测，从而保证食品的安全和质量。要合理运用 HPLC 荧光测定的技术方法进行检测，在对陆地动物中兽药残留进行检测的同时，还能对水生动物中的兽药残留进行准确检测。
1.4.2检测农药残留
人们为了提高农作物的产量，就大量运用化学农药，而食品中存在的农药会对人体的健康造成巨大的伤害。所以，需要进行严格检测。但食品中存在的农药都是有机化合物，产生的分子量较大且不稳定。所以，想要更好地保证食品的安全，就需要运用高效液相色谱技术进行检测。
2、高效液相色谱技术在食品检测中的实际例证
以食品中常用防腐剂检测为例，对高效液相色谱法的实际应用进行分析。目前，常用食品防腐剂为苯甲酸、山梨酸，其对霉菌、酵母的抗菌性强，在pH 4～8有良好的抗菌效果，在酱油、醋中也被作为防腐剂使用。本次运用高效液相色谱同时测定酱油、醋、饮料中的苯甲酸和山梨酸、对羟基苯甲酸酯类（乙酯和丙酯）。
2.1试剂
苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯，标准品，纯度≥ 98%，由中国标准技术开发公司标样开发部提供；超纯水；甲醇，色谱纯；乙酸铵水溶液，0.02 mol/L；氢氧化钠溶液，1.0 mol/L；
亚铁氰化钾溶液，100 g/L；乙酸锌溶液，200 g/L。所有试剂除了注明外均为分析纯。
2.2分析方法
色谱条件：VP-ODS，4.6 mm（i.d）×250 mm 色谱柱，流速1.0 mL/min，柱温为室温，流动相为甲醇-0.02 mol/L乙酸铵，检测波长程序0～4.3 min，230 nm以及4.3～6.2 min，254 nm。进样体积 20 μL。
2.3结果与讨论
2.3.1色谱条件的选择
2.3.1.1检测波长的选择
在 200 ～ 300 nm，使用二极管阵列检测器，对 4种防腐剂进行扫描，紫外光谱上获得最佳检测波长。苯甲酸、山梨酸的最大吸收在 230 nm 左右，羟基苯甲酸酯的最大吸收在 254 nm 左右，根据每组的出峰顺序，分别在不同的时间，对各组最佳吸收波长进行检测，4 种防腐剂检测灵敏度高、检测干扰少，能够满足实验要求。
2.3.1.2流动相及流速的选择
实验采用甲醇-0.02mol/L乙酸铵和甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾水溶液两种体系检测4种防腐剂，结果显示以甲醇 -0.02 mol/L 乙酸铵水溶液体系 4 种防腐剂的分离效果和容量因子比较合适。由于4种防腐剂极性具有较大差异，如果想要同时完全分离，则需要采取梯度洗脱，时间 0.01 min 时，甲醇含量 20%；时间 4.00 min时， 甲 醇 含 量 40%； 时 间 6.00 min 时， 甲 醇 含 量65%；流速为 1.0 mL/min 时，分离效果良好。在该色谱条件下得到色谱图，如图 1 所示。 2.3.2样品前处理条件的选择
在前处理环节，首先对酱油、醋进行稀释，之后分别采用乙酸锌 - 亚铁氰化钾溶液和醋酸铅 - 硫酸钠溶液 2 组沉淀剂进行试验，结果显示，具有较高蛋白质的酱油样品，使用乙酸锌 - 亚铁氰化钾溶液各 5.0 mL沉淀蛋白质，能够达到较好地避免样品蛋白质与胶体影响的效果。这种方法既便捷又快速，回收率良好。
2.3.3线性关系和检测限
在选定的色谱条件下，按配制好的标准系列进行实验，苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯的质量浓度在 0 ～ 200 mg/L 其浓度与峰面积成正比，线性相关系数均达 0.999（n=3），。苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯拟定的方法检测均为 0.5 mg/kg，可满足检测要求。
2.3.4回收率试验
在没有加入防腐剂的样品种，分别加入一定量的标准溶液 X，依据 2.3.2 进行处理，在最佳色谱条件下进行质量浓度测定，每个质量进行 3 测浓度测试，其回收率与精密度见表 1。
2.4实际样品测试
对市售的饮料、酱油、醋抽样检测，按照上述方法进行苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯的测定，每个样品平行测3次，结果见表2。
2.5 讨论
本次实验主要是针对酱油、醋、饮料种的常用防腐剂进行测定，包括醋中苯甲酸、山梨酸，对羟基苯甲酸酯等。在样品处理上，过程简单，分析结果准确、灵敏度高，符合实际工作需求，在酱油、醋、饮料等产品的卫生质量检测中应用，能够获得满意效果。
3、结语
随着我国经济不断发展，人们的生活水平日益提高，对于食品的检测越来越重视。对此，要推广使用高效液相色谱技术，让食品安全检测人员严格控制食品质量。另外，应加强研究，进一步提高高效液相色谱技术水平，弥补其中存在的一些漏洞，充分发挥其应有的价值，为人们的健康和生命安全提供保障。
参考文献：
[1] 苗述 . 高效液相色谱技术在食品检测中的应用 [J].黑龙江科技信息，2015（4）：39.
[2] 刘先德 . 高效液相色譜在食品质量检测中的应用 [J].中国高新技术企业，2015（18）：50-52.
[3] 阳艳娟 . 高效液相色谱技术在食品检测中的应用 [J].食品安全导刊，2015（20）：74-75.
[4] 田富饶，王旭强，叶旭炎，等 . 高效液相色谱法检测红酒中的苯甲酸和山梨酸 [J]. 现代科学仪器，2015（2）：99-101.
（作者单位：河南省口岸食品检验检测所）