【摘 要】
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目的:探讨下调Orai1对急性脑梗死大鼠神经功能的保护作用及可能机制.方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、模型组(model)、Orai1干扰组(shRNA-Orai1)和阴性对照组(
【机 构】
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遵义市第一人民医院,遵义医科大学第三附属医院神经外科,遵义 563000
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目的:探讨下调Orai1对急性脑梗死大鼠神经功能的保护作用及可能机制.方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、模型组(model)、Orai1干扰组(shRNA-Orai1)和阴性对照组(shRNA-NC),15只/组,采用改良Longa线栓法制作急性脑梗死大鼠模型.于造模后24 h,按照Zea-Longa评分标准评估各组大鼠神经功能,TTC法检测各组大鼠脑梗死面积,荧光探针法检测海马组织内Ca2+浓度,TUNEL染色检测海马组织神经元凋亡,Western blot检测大鼠海马组织中凋亡相关蛋白、内质网应激相关蛋白及Orai1和STIM1蛋白表达水平.结果:与sham组相比,model组大鼠神经功能评分升高(P<0.01),脑梗死面积增多(P<0.01),海马组织中Ca2+浓度升高(P<0.01),海马组织神经元凋亡率及凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3和Bax表达水平升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平降低(P<0.01),内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78、IRE-1和Caspase-12蛋白表达水平升高(P<0.01),Orai1和STIM1蛋白表达水平升高(P<0.01);与model组和shRNA-NC组相比,shRNA-Orai1组大鼠神经功能评分降低(P<0.01),脑梗死面积减少(P<0.01),海马组织中Ca2+浓度降低(P<0.05),海马组织神经元凋亡率及凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3和Bax表达水平降低(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平升高(P<0.01),内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78、IRE-1和Caspase-12蛋白表达水平降低(P<0.01),Orai1和STIM1蛋白表达水平降低(P<0.01).结论:下调Orai1基因表达可改善急性脑梗死大鼠神经功能,减少脑梗死面积和神经细胞凋亡,其机制可能与平衡海马内Ca2+浓度、抑制内质网应激相关.
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