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根据基因库中鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的基因序列，分别设计了两对特异性引物，通过对二重RT-PCR扩增条件的优化，研究建立了可同时鉴别检测鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重RT-PCR方法。该方法对同一样品申的鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒模板进行扩增，结果均同时得到2条大小与实验设计相符的202bp（鸭I型肝炎病毒）和474bp（番鸭细小病毒）的特异性扩增条带，对鸭圆环病毒、鹅细小病毒、鸭副黏病毒、鸭瘟病毒和禽流感病毒等病原体的检测全为阴性。敏感性试验结果表明，该技术最低能检测到100fg的鸭I型肝炎病