基于单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析方法定量检测HBeAg阳性患者前C区变异株

来源 :肝脏 | 被引量 : 0次 | 上传用户:baei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的建立一种HBV复杂前C区变异株精确定量的检测系统。方法分两步实时PCR完成检测。首先应用野生株阻断探针(WT-blocker probe)进行选择性抑制野生株病毒的扩增,而含量偏低的变异株病毒得以扩增约10000倍,使其在后续反应中易于检出;第二步应用单标记探针(Simple Probe)结合熔解曲线分析系统精确定量检测前C区G1896A、G1899A、G1896A/G1899A变异株。通过PBPPO(primer-blocker-probe partial-overlap)设计减少基因多态性对检测的影响,来提高检测精确度。检验结果经直接测序及聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法予以证实。结果 4种标准质粒(G1896/G1899、G1896A、G1899A、G1896A/G1899A)能够很好地被检出并予以区分,突变检测灵敏度达到0.01%;10例HBeAg阳性(直接测序法鉴定前C区变异阴性)患者血清标本中,每例至少1种前C区变异株被检出。结论单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析能够早期灵敏检测前C区变异株,前C区变异株进化过程及机制还需进一步大样本、纵向队列研究予以阐明。
其他文献
<正>危重症患者入住ICU以后,身体约束会与其他一些监护治疗的仪器设备同时使用,但是临床上对患者实施身体约束有一定的盲从性,对患者实施约束,其效果对疾病的恢复有着直接的
会议
本文介绍了全球肿瘤的发生情况和趋向,分析了我国肿瘤防治的基本共识,探讨了肿瘤综合治疗的定义和范例。
多无人机协同侦察规划问题是指多架无人机对多目标进行侦察,以最小化无人机数量和总行驶路径最短为目标构建数学模型进行求解的问题。蝙蝠算法是新兴的群体智能算法,前景广阔
本文利用行星式球磨仪和有机微孔膜在较短时间内制成了质量厚度小于100μg/cm2的薄样源,在常规大气压下,利用基于PIPS探测器的α谱仪对不同质量厚度的薄样源进行α能谱测量。
<正>我国重有色冶金技术以火法为主,通过多年技术改进有了很大提高。在现有大型铜冶炼厂中,先后采用闪速炉熔炼、诺兰达工艺、富氧顶吹熔炼及白银法取代了鼓风炉和反射炉熔炼
会议
阿魏酸酯酶(FAEs,EC 3.1.1.73)属于羧酸酯水解酶的一个亚纲,其能够水解植物细胞壁中阿魏酸与多糖之间的酯键,从而将阿魏酸释放出来。阿魏酸酯酶在食品、饲料、医药、造纸、化妆
诚信是中华民族的传统美德。在全面从严治党的新形势下,党员干部讲诚信,不仅要做到对党忠诚、取信于民,而且要做到清正廉洁。廉洁是对党员干部最基本的要求,也是党员干部应有的诚
报纸
室内照明应大力推广紧凑型荧光灯殷乔民沂南县供电局(276300)传统的室内照明采用的普通白炽灯及管型荧光灯都存在着许多缺点,于是人们研制出了光效高、节能的新光源,其中紧凑型荧光灯是
对高层建筑与城市的空间整合,就是要通过一定的方法使高层建筑与其他建筑、高层建筑与城市保持历史完整、生态完整、情态完整。形成时间与空间统一、结构与过程统一、内在本质
股权是综合性权利,兼具财产性和人身性。考虑到有限责任公司的人合性,股权本身不能被共有,夫妻共有的是股权的财产价值,由此股权的财产性权利被分离出股权所有权之外。信托具