同分异构体的鉴别一直是食品掺伪或筛查的热点问题。本文通过C₁₈和CSH Fluoro-Phenyl两种固定相，基于RP - UPLC技术，研究维生素E同分异构体在不同的色谱柱温度（30, 35, 40, 45, 50℃）及不同的有机相（甲醇和乙腈）的保留特征，通过分离度、拖尾因子及容量因子为指标对目标物保留特征进行评价，并在最优的色谱条件下对不同植物油样品中的V_E进行了含量检测。结果表明，CSH Fluoro-Phenyl为固定相，甲醇为有机相时，除β-V_E和γ-V_E可进行部分的分离，具有明显的选择性差异外，其余固定相及有机相均未有明显的选择性差异。样品经乙醇提取，C₁₈为固定相，柱温30 ℃，进样量为1.0 μL，V_E异构体在0.002 ～ 20 mg/L的范围内具有良好的线性，相关系数>0.9993；通过对实际样品的分析验证，本研究建立的方法具高效快速、操作简单、实验成本低等优点，可满足植物油中V_E的快速、准确、高通量的检测。