【摘 要】
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目的 探讨硫酸软骨索酶ABC (chondroitinase ABC,ChABC)联合BMSCs对大鼠脊髓损伤的修复作用.方法 取新生SD大鼠股骨、胫骨骨髓分离培养原代BMSCs.取成年雄性SD大鼠24只,体重2
【机 构】
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西安交通大学医学院第二附属医院骨二科,西安,710004
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目的 探讨硫酸软骨索酶ABC (chondroitinase ABC,ChABC)联合BMSCs对大鼠脊髓损伤的修复作用.方法 取新生SD大鼠股骨、胫骨骨髓分离培养原代BMSCs.取成年雄性SD大鼠24只,体重200～230 g,制备脊髓挤压伤模型后,随机分为脊髓损伤对照组(A组)、BMSCs移植组(B组)、ChABC注射组(C组)和ChABC联合BMSCs移植组(D组),每组6只.伤后7、14d采用BBB评分法评价大鼠后肢运动功能;伤后14d取材行HE染色计算损伤区面积；采用免疫荧光染色法观察胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)/硫酸软骨素蛋白多糖(chondroitin sulfate proteoglycan,CSPG)和GFAP/生长相关蛋白43 (growth associated protein 43,GAP43)双标表达情况. 结果 伤后7d各组大鼠均恢复了后肢3个关节的运动,各组BBB评分比较差异无统计学意义(P＞0.05)；伤后14dA、B、C组大鼠后肢3个关节无负重拖动,D组大鼠足底位于负重位或偶尔足背负重步行,D组BBB评分高于其余3组(P＜ 0.05).伤后14 d HE染色示,各组损伤区形成空洞,空腔内及其周边存在大量巨噬细胞,空洞周围被瘢痕组织包裹；D组损伤区面积显著小于其余3组(P＜0.05).伤后14d,GFAP/CSPG双重免疫染色示D组星形胶质细胞瘢痕损伤区明显减少,未见空洞形成;相对于A组的荧光强度值结果显示,C、D组显著低于B组(P＜0.05).GFAP/GAP43双重免疫染色示D组GAP43免疫组织化学染色阳性纤维穿过损伤区;相对于A组的荧光强度值结果显示,D组显著高于B、C组(P＜ 0.05). 结论 采用ChABC早期抑制星形胶质细胞分泌CSPG,并联合BMSCs移植可促进神经纤维再生,对大鼠脊髓损伤有一定修复作用.
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