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摘要 目的：探讨固本活血膏对稳定期慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-6、TNF-α水平的影响。方法：根据膏方制剂的不同随机分为固本活血膏组和安慰剂组，选择2015年1月至2015年12月江北区中医院60例稳定期COPD患者为试验观察对象，两组各30例患者，治疗组给予固本活血膏，对照组予以安慰剂，治疗60天后，比较固本活血膏组和安慰剂组血清IL-6、TNF-α治疗前后变化;并通过治疗前后中医症候积分变化比较两组患者的临床疗效。结果：固本活血膏组临床疗效积分高于安慰劑组，差异具有统计学意义（P<0.0 5）;治疗前，固本活血膏组和安慰剂组患者血清IL-6、TNF-α比较无明显差异（P>0.0 5），治疗后，固本活血膏组较安慰机组血清IL-6、TNF-α表达下降，差异具有统计学意义（P<0.0 5）。结论：固本活血膏能有效调节血清IL-6、TNF-α水平，减轻炎症反应，临床疗效显著。
关键词 固本活血膏 慢性阻塞性肺疾病 IL-6 TNF-α
Effect of Guben Huoxue plaster on serum lever of IL-6、TNF-αin COPD patients at the stable stage
Tang Jing，Deng Jia△，Liang Ailing，Xiang Dakai
Chongqing jiangbei district hospital of traditional Chinese medicine， chongqing 400000
Abstract：Objective To observe the effect of Guben Huoxue plaster on serum lever of IL-6、TNF-α in the patients with chronic obstructive pulmonary disease（COPD）
at stable stage.Methods 60 patients with COPD in our hospital from January 2015 to December 2015 were randomly divided into therapy group treated with Guben Huoxue plaster and control group treated with placebo（n=30）.The duration of treatment was 60 days.According to the changes in the symptom score of traditional Chinese medicine before and after treatmengt for the patients in two group ，the clincal efficacy was determined.The lever of IL-6、TNF-α in serum were detected before and after treatmennt.Results Tth efficacies were differert significantly in statistics between two group（P<0.05）.The differernce in serum lever of IL-6、TNF-α were not significant statistically before treatment between two group（P>0.05）.After treatment ，in the treatment group，the serum lever of IL-6、TNF-α was lower apparentlly than that in the control group，indication the statistical significant difference（P<0.05）.Conclusion Guben Huoxue plaster effectively regulate IL-6、TNF-α level and relieve apparently the clinical symptoms of the patients with COPD at the stable stage.
Keywords：Guben Huoxue plaster chronic;obstructive pulmonary disease;IL-6;
TNF-α
我国最新的流行病学资料显示慢性阻塞性肺疾病（COPD）的发病率不断上升[1-2]。COPD
是一种非特异性慢性炎症性疾病，它包括了肺血管、肺实质和气道改变，通过血清中炎性因子表达增高和炎性细胞的异常活化，激活炎症因子及释放各种炎症介质，引起全身炎症反应。本研究的目的是测量固本活血膏组及安慰剂组治疗前后血清IL-6、TNF-α的水平，通过比较其差异性，探讨固本活血膏下调稳定期COPD患者血清IL-6、TNF-α的作用机制，指导临床治疗。
1.资料与方法
1.1一般资料
在我院呼吸科门诊，从2016年1月至2016年12月，共有60例COPD稳定期患者参与此次临床研究，通过随机分组，固本活血膏组30例（男22例，女8例），年龄45至71岁。病程7至20年。安慰剂组30例（男19例，女11例），年龄47至72岁，病程8至19年。两组在性别、年龄、病程等一般资料比较无明显差异（P<0.0 5），具有可比性。所有患者均签署病情知情同意书及治疗同意书。 1.2诊断标准：⑴既符合西医2007年中华医学会呼吸分会制定的《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》[3]稳定期诊断标准，也同时符合中医《慢性阻塞性肺疾病中医诊断指南》关于肺胀的诊断标准[4];⑵年龄在40至75周岁之间。
1.3排除标准：⑴对本药物过敏者，需剔除，发生严重不良反应的，纳入不良反应统计;⑵合并有哮喘、支气管扩张、尘肺等严重肺系疾病或合并有心脑血管系统、血液系统、内分泌系统等其他系统疾病;⑶近1-2月有反复加重者或近一周内使用糖皮质激素治疗者;⑷依从性差，无法配合治疗的患者。
2.治疗方法
2.1治疗方案：对照组：对照组：给予安慰剂（江北区中医院制剂室提供，每袋20ml），每次口服1袋，每日2次。治療组：给予固本活血膏（江北区中医院制剂室提供 膏方组成：黄芪450g，生晒参、白术、茯苓、地龙、补骨脂、淫羊藿、丹参各300g经大火煎熬3次后，加入饴糖，小火收膏装袋封藏，每袋20ml），每次口服1袋，早晚各1次，干预治疗60d。
3.疗效观察
3.1观察指标
3.1.1中医症候疗效：参照《新药（中药）临床研究指导原则》[5]将症状、体征制定疗效评分表，分值越高，表示症状越重。显效：患者临床症状明显改善，炎症明显控制;有效：患者临床症状略有缓解，炎症症状好转;无效：临床症状及炎症症状无缓解。总有效率=（显效+有效）/总例数×100%。
3.1.2治疗前后采用ELISA法检测白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，严格执行试剂盒（由上海乔羽生物科技有限公司提供）操作说明。
3.2统计学方法 采用SPSS18.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数（ +S）表示，比较采用t检验，计数资料采用Χ2检验。
4.结果
4.1两组临床疗效比较：固本活血膏组临床疗效明显高于安慰剂组（P<0.05）。结果见表1。
4.2治疗后两组比较，固本活血膏组表达水平低于安慰剂组，差异具有统计学意义（P<0.05）。结果见表2。
5、结论
慢性阻塞性肺疾病（COPD） 病理改变是长期炎性细胞反复浸润、刺激，气道壁结构重塑，从而导致气道狭窄，引起持续性气流受限。肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、人白介素-6（IL-6）及人白介素-10（IL-10）等在炎症反应及免疫应答中水平升高，促进局部炎症反应发生，并且通过大量释放炎症介质、蛋白酶等，放大炎症反应，引起慢性炎症反应发生[6]。
IL-6是一类诱导B淋巴细胞克隆，激活NK 细胞杀伤靶细胞，引起慢性阻塞性肺疾病气道阻塞的具有生物学功能的细胞因子;同时激活炎症细胞，参与TNF-α的促炎反应。在两者协同作用下，使支气管肺泡黏膜上的内皮细胞受到浸润及抑制，造成血管受损，导致COPD患者肺功能进一步恶化[7]。事实上，IL-6在CD4 T细胞分化期间，一方面促进产生IL-17和IL-21，另一方面下调T细胞功能，其下游效应促进抗体复合物，蛋白酶的沉积[8]，从而破坏组织细胞;同时Mehrotra[9]等人发现IL-6在COPD患者死亡率预测中发挥了作用。因此，血清中的IL-6能反应COPD患者的肺功能情况及疾病预后和转归。
TNF-α作为典型的多功能促炎细胞因子，它主要由活化的巨噬细胞产生，也可由CD4 +淋巴细胞，NK细胞，嗜中性粒细胞，肥大细胞等其他细胞类型产生，它主要通过诱导呼吸细胞中NF-κB活化，激活MAPK信号通路，触发和放大炎症反应，改变气道的重塑及影响气道的高反应状态，加重肺组织细胞损伤[10]。因此只有通过抑制TNF-α介导的炎症反应，才有可能改善患者的呼吸道炎症反应。
综上所述，TNF-α、IL-6均参与了由MAPK信号通路介导的呼吸道炎症反应，其在血清中的水平变化，对判断COPD稳定的病情变化及进程均有重要的临床意义。本研究中固本活血膏能显著改善稳定期COPD患者的临床症状，降低血清IL-6和肿瘤坏死因子-α表达。因此，我们认为固本活血软膏可以调节炎症水平，改善患者呼吸道炎症反应，影响疾病的预后及转归，但其具体作用机理需进一步探讨。
参考文献
[1]孙永昌，姚婉贞.慢性阻塞性肺疾病诊断治疗及预防全球策略三年更新评述[J].中华结核和呼吸杂志，2010，33（9）： 633-635
[2]Straud DA，Minocchieri S，Moeller A，et al.The effect of montelukast on exhaled
ntric oxide and lung function in asthmatic children 2 to 5years old[J].Chest，
2012，134（2）： 509-514
[3] 中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组慢性阻塞性肺疾病诊治指南（修订版）[J].中华结核和呼吸杂志，2007，30（1）：8-7
[4] 李建生，李素云，余学庆.慢性阻塞性肺疾病中医诊疗指南（2001）[J].中医杂志，2012，53（1）：80-83.
[5] 郑筱萸.中药新药临床研究指导原则（试行）[M].北京：中国医药科技出版社.2002：57-58.
[6] Attaran D，Lari SM，Towhidi M，et al.Interleukin - 6 and airflow limitation in chemical warfare patients with chronic obstructive pulmonary disease[J].Int J Chron Obstruct Pulmon Dis，2010（5）：335-340.
[7] Rennard S I.The role of free radical oxidation and endothelial dysfunction in the onset and progression of chronic obstructive pulmonary disease.Ter Arkh，2011，83（3）：74-77
[8] Kolsum U， Roy K， Starkey C， Borrill Z， Truman N， Vestbo J， et al. The repeat
ability of interleukin-6， tumor necrosis factor alpha， and C-reactive protein in COPD patients over one year.Int J Chron Obstruct Pulmon Dis 2009; 4： 149- 56.
[9] Mehrotra N， Freire AX， Bauer DC， Harris TB， Newman AB，Kritchevsky SB， et al. Predictors of mortality in elderly subjects with obstructive airway disease： the PILE score. Ann Epidemiol 2010; 20 （3）： 223- 32.
[10] Pace E， Ferraro M， Di Vincenzo S， Cipollina C， Gerbino S， Cigna D，et al. Comparative cytoprotective effects of carbocysteine and ?uticasone propionate in cigarette smoke extract-stimulated bronchial epithelial cells. Cell Stress Chaperones 2013; 18： 733–43.
关键词 固本活血膏 慢性阻塞性肺疾病 IL-6 TNF-α
Effect of Guben Huoxue plaster on serum lever of IL-6、TNF-αin COPD patients at the stable stage
Tang Jing，Deng Jia△，Liang Ailing，Xiang Dakai
Chongqing jiangbei district hospital of traditional Chinese medicine， chongqing 400000
Abstract：Objective To observe the effect of Guben Huoxue plaster on serum lever of IL-6、TNF-α in the patients with chronic obstructive pulmonary disease（COPD）
at stable stage.Methods 60 patients with COPD in our hospital from January 2015 to December 2015 were randomly divided into therapy group treated with Guben Huoxue plaster and control group treated with placebo（n=30）.The duration of treatment was 60 days.According to the changes in the symptom score of traditional Chinese medicine before and after treatmengt for the patients in two group ，the clincal efficacy was determined.The lever of IL-6、TNF-α in serum were detected before and after treatmennt.Results Tth efficacies were differert significantly in statistics between two group（P<0.05）.The differernce in serum lever of IL-6、TNF-α were not significant statistically before treatment between two group（P>0.05）.After treatment ，in the treatment group，the serum lever of IL-6、TNF-α was lower apparentlly than that in the control group，indication the statistical significant difference（P<0.05）.Conclusion Guben Huoxue plaster effectively regulate IL-6、TNF-α level and relieve apparently the clinical symptoms of the patients with COPD at the stable stage.
Keywords：Guben Huoxue plaster chronic;obstructive pulmonary disease;IL-6;
TNF-α
我国最新的流行病学资料显示慢性阻塞性肺疾病（COPD）的发病率不断上升[1-2]。COPD
是一种非特异性慢性炎症性疾病，它包括了肺血管、肺实质和气道改变，通过血清中炎性因子表达增高和炎性细胞的异常活化，激活炎症因子及释放各种炎症介质，引起全身炎症反应。本研究的目的是测量固本活血膏组及安慰剂组治疗前后血清IL-6、TNF-α的水平，通过比较其差异性，探讨固本活血膏下调稳定期COPD患者血清IL-6、TNF-α的作用机制，指导临床治疗。
1.资料与方法
1.1一般资料
在我院呼吸科门诊，从2016年1月至2016年12月，共有60例COPD稳定期患者参与此次临床研究，通过随机分组，固本活血膏组30例（男22例，女8例），年龄45至71岁。病程7至20年。安慰剂组30例（男19例，女11例），年龄47至72岁，病程8至19年。两组在性别、年龄、病程等一般资料比较无明显差异（P<0.0 5），具有可比性。所有患者均签署病情知情同意书及治疗同意书。 1.2诊断标准：⑴既符合西医2007年中华医学会呼吸分会制定的《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》[3]稳定期诊断标准，也同时符合中医《慢性阻塞性肺疾病中医诊断指南》关于肺胀的诊断标准[4];⑵年龄在40至75周岁之间。
1.3排除标准：⑴对本药物过敏者，需剔除，发生严重不良反应的，纳入不良反应统计;⑵合并有哮喘、支气管扩张、尘肺等严重肺系疾病或合并有心脑血管系统、血液系统、内分泌系统等其他系统疾病;⑶近1-2月有反复加重者或近一周内使用糖皮质激素治疗者;⑷依从性差，无法配合治疗的患者。
2.治疗方法
2.1治疗方案：对照组：对照组：给予安慰剂（江北区中医院制剂室提供，每袋20ml），每次口服1袋，每日2次。治療组：给予固本活血膏（江北区中医院制剂室提供 膏方组成：黄芪450g，生晒参、白术、茯苓、地龙、补骨脂、淫羊藿、丹参各300g经大火煎熬3次后，加入饴糖，小火收膏装袋封藏，每袋20ml），每次口服1袋，早晚各1次，干预治疗60d。
3.疗效观察
3.1观察指标
3.1.1中医症候疗效：参照《新药（中药）临床研究指导原则》[5]将症状、体征制定疗效评分表，分值越高，表示症状越重。显效：患者临床症状明显改善，炎症明显控制;有效：患者临床症状略有缓解，炎症症状好转;无效：临床症状及炎症症状无缓解。总有效率=（显效+有效）/总例数×100%。
3.1.2治疗前后采用ELISA法检测白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，严格执行试剂盒（由上海乔羽生物科技有限公司提供）操作说明。
3.2统计学方法 采用SPSS18.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数（ +S）表示，比较采用t检验，计数资料采用Χ2检验。
4.结果
4.1两组临床疗效比较：固本活血膏组临床疗效明显高于安慰剂组（P<0.05）。结果见表1。
4.2治疗后两组比较，固本活血膏组表达水平低于安慰剂组，差异具有统计学意义（P<0.05）。结果见表2。
5、结论
慢性阻塞性肺疾病（COPD） 病理改变是长期炎性细胞反复浸润、刺激，气道壁结构重塑，从而导致气道狭窄，引起持续性气流受限。肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、人白介素-6（IL-6）及人白介素-10（IL-10）等在炎症反应及免疫应答中水平升高，促进局部炎症反应发生，并且通过大量释放炎症介质、蛋白酶等，放大炎症反应，引起慢性炎症反应发生[6]。
IL-6是一类诱导B淋巴细胞克隆，激活NK 细胞杀伤靶细胞，引起慢性阻塞性肺疾病气道阻塞的具有生物学功能的细胞因子;同时激活炎症细胞，参与TNF-α的促炎反应。在两者协同作用下，使支气管肺泡黏膜上的内皮细胞受到浸润及抑制，造成血管受损，导致COPD患者肺功能进一步恶化[7]。事实上，IL-6在CD4 T细胞分化期间，一方面促进产生IL-17和IL-21，另一方面下调T细胞功能，其下游效应促进抗体复合物，蛋白酶的沉积[8]，从而破坏组织细胞;同时Mehrotra[9]等人发现IL-6在COPD患者死亡率预测中发挥了作用。因此，血清中的IL-6能反应COPD患者的肺功能情况及疾病预后和转归。
TNF-α作为典型的多功能促炎细胞因子，它主要由活化的巨噬细胞产生，也可由CD4 +淋巴细胞，NK细胞，嗜中性粒细胞，肥大细胞等其他细胞类型产生，它主要通过诱导呼吸细胞中NF-κB活化，激活MAPK信号通路，触发和放大炎症反应，改变气道的重塑及影响气道的高反应状态，加重肺组织细胞损伤[10]。因此只有通过抑制TNF-α介导的炎症反应，才有可能改善患者的呼吸道炎症反应。
综上所述，TNF-α、IL-6均参与了由MAPK信号通路介导的呼吸道炎症反应，其在血清中的水平变化，对判断COPD稳定的病情变化及进程均有重要的临床意义。本研究中固本活血膏能显著改善稳定期COPD患者的临床症状，降低血清IL-6和肿瘤坏死因子-α表达。因此，我们认为固本活血软膏可以调节炎症水平，改善患者呼吸道炎症反应，影响疾病的预后及转归，但其具体作用机理需进一步探讨。
参考文献
[1]孙永昌，姚婉贞.慢性阻塞性肺疾病诊断治疗及预防全球策略三年更新评述[J].中华结核和呼吸杂志，2010，33（9）： 633-635
[2]Straud DA，Minocchieri S，Moeller A，et al.The effect of montelukast on exhaled
ntric oxide and lung function in asthmatic children 2 to 5years old[J].Chest，
2012，134（2）： 509-514
[3] 中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组慢性阻塞性肺疾病诊治指南（修订版）[J].中华结核和呼吸杂志，2007，30（1）：8-7
[4] 李建生，李素云，余学庆.慢性阻塞性肺疾病中医诊疗指南（2001）[J].中医杂志，2012，53（1）：80-83.
[5] 郑筱萸.中药新药临床研究指导原则（试行）[M].北京：中国医药科技出版社.2002：57-58.
[6] Attaran D，Lari SM，Towhidi M，et al.Interleukin - 6 and airflow limitation in chemical warfare patients with chronic obstructive pulmonary disease[J].Int J Chron Obstruct Pulmon Dis，2010（5）：335-340.
[7] Rennard S I.The role of free radical oxidation and endothelial dysfunction in the onset and progression of chronic obstructive pulmonary disease.Ter Arkh，2011，83（3）：74-77
[8] Kolsum U， Roy K， Starkey C， Borrill Z， Truman N， Vestbo J， et al. The repeat
ability of interleukin-6， tumor necrosis factor alpha， and C-reactive protein in COPD patients over one year.Int J Chron Obstruct Pulmon Dis 2009; 4： 149- 56.
[9] Mehrotra N， Freire AX， Bauer DC， Harris TB， Newman AB，Kritchevsky SB， et al. Predictors of mortality in elderly subjects with obstructive airway disease： the PILE score. Ann Epidemiol 2010; 20 （3）： 223- 32.
[10] Pace E， Ferraro M， Di Vincenzo S， Cipollina C， Gerbino S， Cigna D，et al. Comparative cytoprotective effects of carbocysteine and ?uticasone propionate in cigarette smoke extract-stimulated bronchial epithelial cells. Cell Stress Chaperones 2013; 18： 733–43.