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通过敲除啤酒酵母中8-丙基苹果酸脱氢酶基因（LEU2），研究该基因对工业啤酒酵母高级醇特别是异戊醇生成量的影响。通过醋酸锂一步转化法，将一段两端具有LEU2基因序列同源区，中间为遗传霉素（G418）抗性基因的DNA片段转入酵母细胞中，与LEU2基因的ORF（openreadingflames）进行同源重组，利用遗传霉素抗性进行筛选。将突变株与出发菌株进行发酵实验，测定其发酵性能和高级醇的生成量。筛选获得了LEU2基因突变的工、啦啤酒酵母。在支链氨基酸含量较低的培养基中进行发酵测定，突变株发酵液中高级醇含量