【摘 要】
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根据GenBank中绵羊、牛的Hairless和β-actin基因编码区保守序列,设计特异性引物,提取皮肤组织总RNA,经反转录RT-PCR扩增,产物回收纯化后与pGM-T载体连接,转化大肠杆菌感受态
【机 构】
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内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室,内蒙古农业大学动物科学与医学学院,安徽省农业委员会,内蒙古白绒山羊种羊场
【基金项目】
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国家绒毛用羊产业技术体系项目（nycytx-40-8）, 国家“863”计划（2007AA10Z151）, 内蒙古农业大学博士科研启动基金项目（BJ07-50）
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根据GenBank中绵羊、牛的Hairless和β-actin基因编码区保守序列,设计特异性引物,提取皮肤组织总RNA,经反转录RT-PCR扩增,产物回收纯化后与pGM-T载体连接,转化大肠杆菌感受态细胞Top10,质粒提取后经酶切、PCR和测序鉴定,获得阳性Hairless、β-actin重组质粒;将阳性重组质粒按103～107拷贝/反应梯度稀释作为模板,进行实时荧光定量PCR,系统软件自动生成标准曲线及回归方程。结果显示,产物熔解曲线峰值单一,说明引物特异性高,且无引物二聚体;Hairless和β-a
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