【摘 要】
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目的 探讨肾素通过非血管紧张素Ⅱ(angiotesin Ⅱ,AngⅡ)途径对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响及其可能的分子机制.方法 采用组织块贴壁法培养原代大鼠主动脉平滑肌细胞,利用β-甘油磷酸钠联合丙酮酸钠制备血管平滑肌细胞钙化模型.细胞随机分为6组：即空白对照组(予常规培养基),钙化组(予钙化培养基),钙化+ AngⅡ受体阻断剂组(予钙化培养基,再予Losartan 10-6 mol/L和PD1
【机 构】
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山西医科大学第一医院,陕西省太原市030001 山西医科大学第二医院,陕西省太原市030001
【出 处】
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第十二次全国动脉硬化性疾病学术会议
论文部分内容阅读
目的 探讨肾素通过非血管紧张素Ⅱ(angiotesin Ⅱ,AngⅡ)途径对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响及其可能的分子机制.方法 采用组织块贴壁法培养原代大鼠主动脉平滑肌细胞,利用β-甘油磷酸钠联合丙酮酸钠制备血管平滑肌细胞钙化模型.细胞随机分为6组：即空白对照组(予常规培养基),钙化组(予钙化培养基),钙化+ AngⅡ受体阻断剂组(予钙化培养基,再予Losartan 10-6 mol/L和PD123,319 10-5 mol/L分别阻断AngⅡ受体AT1、AT2),钙化+肾素(10-10、10-9、10-8 mmol/L)组(于钙化培养基中,先加入Losartan10-6 mol/L和PD123,319 10-5 mol/L,再分别予10-10、10-9、10-8 mmol/L肾素).用Von Kossa染色鉴定钙化细胞,测定各组细胞中钙含量、碱性磷酸酶(ALP)活性判断钙化程度.用RT-PCR检测成骨细胞标志物核结合因子1(Cbfα1)及转化生长因子β1(TGFβ1) mRNA表达,用Western blot法测定各组细胞Cbfα1蛋白含量.结果 与空白对照组相比,钙化组钙含量、ALP活性显著增加,Cbfα1、TGFβ1 mRNA表达和Cbfα1蛋白表达明显增加(P＜0.01).钙化+AngⅡ受体阻断剂组与钙化组相比,对钙化影响无统计学差异.与钙化+AngⅡ受体阻断剂组相比,钙化+肾素(10-10、10-9、10-8mmol/L)组呈肾素剂量依赖地进一步促进大鼠血管平滑肌细胞的钙含量、ALP活性,以及Cbfα1、TGFβ1 mRNA表达和Cbfα1蛋白表达(P＜0.05).结论 肾素可通过非血管紧张素Ⅱ途径作用促进β-甘油磷酸钠诱导的血管平滑肌细胞钙化,其作用可能与TGFβ1、Cbfα1表达上调有关.
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