观察顺铂诱导大鼠耳蜗螺旋神经节细胞（spiral ganglion cell，SGC）死亡的模式，探讨凋亡相关基因BNIP3在顺铂诱导神经元死亡中的作用。
方法体外分离培养大鼠耳蜗基底膜SGC，加入100μmol/L的顺铂建立损伤模型。通过实时定量聚合酶链反应（PCR）检测SGC凋亡相关基因BNIP3的表达情况；采用蛋白印迹杂交（Western blot）检测半胱氨酸蛋白酶蛋白-3（caspase-3）特异降解产物et血影蛋白（α-spectrin）的表达，间接确定caspase-3活性；采用免疫荧光技术，观察BNIP3蛋白的表达定位及其与顺铂耳毒性损伤的关系。
结果顺铂作用后12h，细胞形态变小，神经纤维出现结节和断裂，神经丝抗体（NF-200）标记阳性的细胞数目减少。离体培养的SGC在顺铂作用3h，6h和12h，BNIP3基因转录活性明显增加，与对照组相比差异具有统计学意义（P值均<0.05）。Westernblot结果显示，对照组中α-spectron降解带灰度值比值（X±s，下同）为0.10±0.05，顺铂作用6h、12h后该比值分别上升为0.49±0.09和0.75±0.08，与对照组相比差异具有统计学意义（q：8.63及14.61，P值均<0.01）；同时顺铂作用12h组与顺铂作用6h组相比，差异也具有统计学意义（q=5.98，P<0.05）。正常SGC不表达或在细胞质中微弱表达BNIP3蛋白；顺铂损伤后BNIP3蛋白表达明显增强，并且强表达的BNIP3蛋白定位于SGC细胞核，周围的支持细胞中BNIP3蛋白的表达也明显增高，但表达定位于细胞质而不是细胞核。
结论顺铂诱导大鼠耳蜗SGC凋亡过程中，BNIP3在神经元及其周围的支持细胞中可能遵循不同的信号传导途径，在SGC中BNIP3可能是通过结合DNA，在转录水平调节某些凋亡相关基因的表达从而诱导细胞凋亡。