荷花ISSR—PCR反应体系的建立及优化

来源 :亚热带农业研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dragoncool
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以荷花叶片提取的基因组DNA为材料,通过对影响ISSR—PCR扩增效果的一些因素,如dNTPs浓度、Mg2+浓度、TαDNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量以及退火温度等进行筛选和优化,确立了可用于荷花ISSR—PCR分析的最适宜的PCR反应体系:20μL PCR反应体积含O.4mmol·L-1 dNTPs、3.5mmol·L-1Mg2+、1.5U TαqDNA聚合酶、0.4μmol·μL-1引物、3ng模板DNA。PCR扩增程序为:94℃预变性2min,94oC变性30
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