【摘 要】
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目的 探讨超微超顺磁氧化铁(USPIO)粒子负载的,CD40突变体抗体分子探针的构建方法和其生物、理化性状,以及在体外对卵巢癌的靶向作用.方法 采用化学交联法将单克隆抗体交联于
【机 构】
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江苏省苏北人民医院医学影像科,苏州大学附属第一人民医院临床免疫实验室
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目的 探讨超微超顺磁氧化铁(USPIO)粒子负载的,CD40突变体抗体分子探针的构建方法和其生物、理化性状,以及在体外对卵巢癌的靶向作用.方法 采用化学交联法将单克隆抗体交联于二巯基丁二酸(DMSA)修饰的USPIO,形成具有免疫活性的分子探针,进行磁学性能鉴定.USPIO标记的抗人CD40突变体单克隆抗体5H6(5H6-USPIO)作为实验组,USPIO标记的抗人CD40单克隆抗体5C11(5C11-USPIO)及USPIO为对照组.通过流式细胞术、共聚焦显微镜及普鲁士蓝染色分析其体外生物学特性,采用3.0T MR对探针与高表达CD40突变体卵巢癌(HO8910)进行体外细胞成像.信号变化数据组间比较采用单因素方差分析和LSD检验.采用Cell Counting Kit-8试剂盒检测探针对HO8910细胞的增殖影响.结果 携带USPIO的抗CD40突变体分子探针被成功构建并分离纯化.合成的探针同USPIO相比具有相似的磁学特性和良好的稳定性.流式细胞术、共聚焦显微镜及普鲁士蓝染色证实抗体分子探针能够特异性识别HO8910细胞表面的CD40突变体,对细胞HO8910的增殖无影响.体外MRI显示探针同HO8910细胞结合后T2、T2*值明显缩短,T2图像较对照组明显变暗.5H6-USPIO组的T2、T2*弛豫时间分别为(40.05±1.62)、(3.08±0.11)ms,短于5C11-USPIO[分别为(85.38±4.74)和(11.82±1.00)ms]和USPIO组[分别为(91.62±3.35)和(13.60±1.92)ms],差异均有统计学意义(F值分别为196.29、60.73,P值均＜0.01),而5C11-USPIO、USPIO两组T2、T2*弛豫时间差异无统计学意义(P值均＞0.05).结论 化学交联法可制备出CD40突变体单克隆抗体超顺磁氧化铁粒子探针,该探针具有良好磁学特性及较高生物活性,能够特异性识别卵巢癌细胞HO8910.
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