高效液相色谱测定血清皮质醇

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高效液相色谱测定血清皮质醇的方法,0.5ml血清加150ng地塞美松(内标剂)在55℃孵育15分钟后用5ml乙醚提取类固醇。移有机相于一尖底管、蒸干,残留物用100μl动相(1,2─二氯乙烷、异丙醇、环已烷按6/11/83容积混合,每升加冰醋酸0.2ml)重溶,注20μl于色谱系统。分析柱为Shim─packCLC─CN柱,柱温40℃,流速2.0ml/分。检测器波长242nm,0.001A满刻度。皮质醇和内标剂的相对保留时间分别为4.68和5.14分。分析回收率平均在98.1~100.0%之间,批内和批间CV<4%。本法在68.89~1103.54nmol/L之间呈线性,回归方程y=0.0242+0.0052x,r=0.9996,最低检出限13.8nmol/L。158名健康成人上午8~9时血清用本法测得皮质醇浓度为193.12土65.00nmol/L(70.07+23.56μl/L),男性(n=81)平均213.69土61.3Onmol/L(77.31±22.22μg/L)明显高于女性的(n=77)172.23±62.43nmol/L(62.46±22.63μg/L),P<0.001。
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