猪细小病毒SYBR Green I实时定量PCR检测方法的建立

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利用PER技术扩增出猪细小病毒VP2保守区基因194bp片段,并克隆到pGEMT载体上,纯化质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR Green I荧光定量PER扩增并制作标准曲线,建立了猪细小病毒的荧光定量PER检测方法。该方法检测灵敏度可达1.0×10^2拷贝/μL,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒和猪流感病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对10份疑似病料和阴性病料进行了检测,发现10份均为荧光定量PE
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