【摘 要】
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目的构建多拷贝脑钠肽（BNP）基因重组表达质粒，并探讨BNP基因的拷贝数与其表达水平的相关性。方法通过人工合成和PCR技术扩增BNP基因，将其克隆至载体pCW111中，构建表达质粒pBNP11，并
【基金项目】
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深圳大学科研启动基金资助项目(200711)
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目的构建多拷贝脑钠肽（BNP）基因重组表达质粒，并探讨BNP基因的拷贝数与其表达水平的相关性。方法通过人工合成和PCR技术扩增BNP基因，将其克隆至载体pCW111中，构建表达质粒pBNP11，并通过亚克隆构建含有不同数量表达盒的正向串联表达质粒，分别转化大肠杆菌DH5a和BL21（DE3），经温度诱导表达，SDS-PAGE分析，并经激光扫描测定目的蛋白的表达量。结果测序及酶切鉴定证明1—3拷贝BNP重组表达质粒构建正确，重组蛋白在大肠杆菌DH5a和BL21（DE3）中均可获得表达，表达量分别为菌体总蛋白
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