【摘 要】
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目的:进一步鉴定表达人干扰素α-2b的重组乳杆菌DM8909/pSC111AE-IFN-α-2b,考察重组菌的培养条件及其表达产物动态的抗病毒活性。方法:在LRS培养基培养重组菌株DM8909/pSC11
【机 构】
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首都医科大学病原生物学系; 内蒙古医学院; 美国Symbigene公司; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室; 大连医科大学微生态研
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目的:进一步鉴定表达人干扰素α-2b的重组乳杆菌DM8909/pSC111AE-IFN-α-2b,考察重组菌的培养条件及其表达产物动态的抗病毒活性。方法:在LRS培养基培养重组菌株DM8909/pSC111AE-IFN-α-2b并诱导表达,用Western印迹鉴定培养上清中的表达产物,对重组菌株在LRS培养基中的不同时间的D600、pH值、活菌数、表达产物抗病毒活性进行动态观察。结果:Western印迹鉴定证实了重组菌上清中的IFN-α-2b。重组菌培养18h后pH值由6.5开始下降,56h后降至3.5;细菌于培养21h进入对数期,32h进入稳定期;培养24~32h上清中干扰素抗病毒活性为4.08×105U/ml。结论:重组乳杆菌DM8909/pSC111AE-IFN-α-2b可表达IFN-α-2b于培养上清,培养24~32h上清中干扰素含量最高,可用于预防及治疗病毒感染的进一步研究。
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