表达人干扰素α-2b基因重组乳杆菌的鉴定及其抗病毒活性的动态研究

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目的:进一步鉴定表达人干扰素α-2b的重组乳杆菌DM8909/pSC111AE-IFN-α-2b,考察重组菌的培养条件及其表达产物动态的抗病毒活性。方法:在LRS培养基培养重组菌株DM8909/pSC111AE-IFN-α-2b并诱导表达,用Western印迹鉴定培养上清中的表达产物,对重组菌株在LRS培养基中的不同时间的D600、pH值、活菌数、表达产物抗病毒活性进行动态观察。结果:Western印迹鉴定证实了重组菌上清中的IFN-α-2b。重组菌培养18h后pH值由6.5开始下降,56h后降至3.5;细菌于培养21h进入对数期,32h进入稳定期;培养24~32h上清中干扰素抗病毒活性为4.08×105U/ml。结论:重组乳杆菌DM8909/pSC111AE-IFN-α-2b可表达IFN-α-2b于培养上清,培养24~32h上清中干扰素含量最高,可用于预防及治疗病毒感染的进一步研究。
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