以免疫球蛋白为载体的抗O型口蹄疫病毒基因工程疫苗的构建

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以自体免疫球蛋白作为外源抗原的载体来研制疫苗是一条研制安全、高效疫苗的新途径.将猪IgGH链基因中的CDR3区缺失,剩余的两个片段分别连接到pBluescriptⅡSK(+)和pBluescriptⅡKS(+)上,其中一片段再与编码FMDVVP1两个拷贝的141~160位氨基酸残基和一个拷贝的200~213位氨基酸残基构成的串联片段20AA~14AA~20AA的核苷酸片段相连.然后将它们切下与质粒表达载体pET28b相连,构建出融合表达质粒pET28b-FH,经限制酶酶解及DNA序列分析证明该融合基因各连接点及读框正确.转入大肠杆菌BL21(DE3)plysS表达出一分子量为64kD的蛋白质.经ELISA检验证明,大肠杆菌细胞中表达的融合蛋白有O型FMDV抗原活性.将该融合蛋白肌肉注射免疫豚鼠和猪,攻毒实验表明,疫苗pET28b-FH对豚鼠产生了保护作用,保护率为66%,对猪也有保护作用.
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