羊布鲁氏菌omp25基因原核表达载体的构建与鉴定

来源 :内蒙古医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:txluoyang
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目的:利用PCR反应从羊布鲁氏菌基因组DNA中克隆omp25基因,并将其构建到原核表达载体pET -32a中.方法:试剂盒法提取羊布鲁氏菌基因组DNA,设计合适的引物,通过PCR反应从基因组中扩增外膜蛋白OMP25的编码基因(omp25).将得到的基因片段连接到克隆载体pMD19 -T的多克隆位点(MCS)中,将连接体pMD19 -T - omp25转化感受态大肠杆菌DH5(并进行筛选和克隆扩增,提取质粒并进行酶切分析与序列测定.利用酶切与连接反应将目的基因( omp25)插入载体pET -32a的多克隆
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