目的 探讨雷公藤内酯醇(TPL)对前列腺癌DU145细胞株的作用及其机制.方法 分别用0、5、25、50、100 nmol/L浓度的TPL作用于DU145细胞24、48 h.噻唑蓝(MTT)比色法观察TPL对DU145细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)双染法检测细胞凋亡;PI染色后激光共聚焦显微镜观察凋亡细胞核的形态改变;Western blot检测组蛋白3赖氨酸27三甲基化(H3 K27me3)、果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测EZH2基因的表达.结果 TPL对DU145细胞增殖有显著的抑制作用,24 h的半数抑制剂量(IC50)值为(68.71 ±0.15) nmol/L;48 h的IC50值为(36.87 ±5.80) nmol/L,与未加TPL的对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).与正常对照组比较,随着药物浓度的增加(25、50、100 nmol/L),凋亡率也逐渐增加,早期凋亡率分别为(10.9±1.3)％、(22.4±1.3)％和(31.3±2.4)％,两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).PI染色显示经TPL处理的DU145细胞部分表现出细胞核的高度浓缩,为细胞凋亡的重要特征;用不同浓度的TPL处理细胞24 h后,Western blot检测DU145细胞H3 K27 me3及EZH2的蛋白表达量均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).FQ-PCR检测显示TPL处理组EZH2基因表达量显著降低,并且也表现出浓度-效应关系.结论 TPL可以抑制DU145生长增殖并诱导细胞凋亡,并且可能是通过组蛋白修饰这一表观遗传机制来实现的。
雷公藤内酯醇对前列腺癌细胞的作用及机制
【摘 要】
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目的 探讨雷公藤内酯醇(TPL)对前列腺癌DU145细胞株的作用及其机制.方法 分别用0、5、25、50、100 nmol/L浓度的TPL作用于DU145细胞24、48 h.噻唑蓝(MTT)比色法观察TPL对DU145细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)双染法检测细胞凋亡;PI染色后激光共聚焦显微镜观察凋亡细胞核的形态改变;W
【机 构】
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【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2014年31期
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