【摘 要】
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目的:构建人骨保护素(OPG)成熟肽cDNA重组表达载体,实现其在毕赤酵母中的高效表达.方法:由人成骨细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增得到人OPG成熟肽cDNA,克隆入分泌型表达载体pPIC9
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目的:构建人骨保护素(OPG)成熟肽cDNA重组表达载体,实现其在毕赤酵母中的高效表达.方法:由人成骨细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增得到人OPG成熟肽cDNA,克隆入分泌型表达载体pPIC9K,转化酵母细胞,G418筛选多拷贝整合的重组子进行甲醇诱导表达,产物行Western blotting鉴定.结果:成功构建了人OPG成熟肽表达载体,该载体能在酵母细胞中获得分泌表达,诱导96 h的表达量占上清总蛋白的30%.重组蛋白相对分子质量约55 ku,可被OPG抗体识别.结论:重组人OPG成熟肽在酵母表达
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