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目的:构建并验证 Brugada 综合征相关钠通道 SCN5a 基因 R104W 突变体。方法采用一步法 PCR 突变技术,以 pEGFP-SCN5a 为模板,体外定点诱变构建 pEGFP-SCN5a-R104W 突变体,进行基因测序,并用 Lipofectamine TM3000脂质体转染法转入 HEK293细胞,通过 Western blotting 和膜片钳记录检测蛋白质表达和电流加以验证。结果测序结果显示 SCN5a-R104W 突变体基因序列上第310 C〉T,其他序列碱基与野生型相比未发生改变