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  5. 大肠癌相关基因PGDH原核表达质粒的构建及表达

大肠癌相关基因PGDH原核表达质粒的构建及表达

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gelsy1982
【摘 要】
：
目的构建15-羟基前列腺素脱氢酶（PGDH）原核表达质粒，并在大肠杆菌中诱导表达PGDH蛋白。方法以人正常大肠黏膜组织总RNA为模板，利用RT-PCR扩增PGDH基因的编码序列，克隆入原核表达载
【作 者】
：
李美宁 冯燕 常冰梅 解军 张悦红 殷云勤 程牛亮 
【机 构】
：
山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西医科大学第一医院消化检验中心
【出 处】
：
中国生物制品学杂志
【发表日期】
：
2008年4期
【关键词】
：
大肠癌 15-羟基前列腺素脱氢酶 克隆 原核表达 Colorectal cancer  15-hydroxyproglandin dehydrogenase（P 
【基金项目】
：
山西省科技攻关资助项目（2006031087-02）.
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目的构建15-羟基前列腺素脱氢酶（PGDH）原核表达质粒，并在大肠杆菌中诱导表达PGDH蛋白。方法以人正常大肠黏膜组织总RNA为模板，利用RT-PCR扩增PGDH基因的编码序列，克隆入原核表达载体pBV220，转化E．coliDH5α，经温控诱导表达，并经Ni^2＋-NTA亲和层析纯化，目的蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果重组质粒pBV220-PGDH-His6经PCR及酶切鉴定，证明质粒构建正确。经温控诱导后，可表达出相对分子质量约为29000的PGDH-His6蛋白，表达产
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