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为探讨乙醇不同作用时间对角膜上皮瓣活性的影响，并确定角膜上皮瓣的解剖分离层面，按标准LASEK手术方法制备尸体眼角膜上皮瓣，进行HE、PCNA、层粘连蛋白免疫组化及Ⅶ型胶原免疫荧光染色，评价角膜上皮瓣细胞活性，确定LASEK手术中角膜上皮瓣的解剖分离层面。结果显示，角膜上皮瓣为复层上皮细胞组织，没有Bowman层和角膜基质成份，PCNA阳性率为乙醇作用时间20s〉30s〉40s，其层粘蛋白（laminin）染色在角膜床和上皮瓣基底膜一测均有呈片段样棕色条纹状，其胶原Ⅶ染色阳性反应呈一条绿色线形，而且只存在