T7 启动子作用下人尿激酶原 cDNA 在大肠杆菌中的高效表达及分离纯化

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化学合成的人尿激酶原cDNA克隆在表达质粒pET11d中,在T7启动子的作用下,经01mmol/LIPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中获得表达。其表达量占菌体总蛋白的15%,表达产物以无活性的包涵体形式存在。经体外变复性,Zn2+选择性沉淀,抗体亲和柱层析,及Benzamidine亲和吸附,所表达的人尿激酶原被纯化为单一条带,其比活约110000IU/mg。
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