目的:探讨单个核细胞接种密度对内皮祖细胞体外培养扩增的影响。方法:采集正常脐血,用密度梯度离心法分离单个核细胞并接种在包被纤维连接蛋白的24孔培养板中。按接种的密度分为5组,即1×106/cm2,2×106/cm2,3×106/cm2,4×106/cm2及5×106/cm2。在培养的第7天,计数各组每孔细胞的集落数和贴壁细胞数。用流式细胞术和免疫荧光染色法对细胞的表面标志及功能进行鉴定。结果:以不同密度接种的各组每1×106个单个核细胞得到的集落数和贴壁细胞数不同。3×106/cm2组的细胞集落和细胞数最多,细胞的集落数和贴壁细胞数具有良好的相关性。结论:贴壁筛选法培养内皮祖细胞,脐血单个核细胞接种密度以3×106/cm2为宜,通过计数细胞集落可粗略估计内皮祖细胞的增殖能力。