结核分枝杆菌Ag85A蛋白的原核表达、纯化和免疫反应性

来源 :基础医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liaqin18

【摘要】

：

目的通过原核表达获得结核分枝杆菌Ag85A蛋白。方法用PCR从结核分枝杆菌H37Rv菌株中扩增出编码Ag85A的拍刚基因，克隆入原核表达载体pProEXHTb，产生重组质粒pPro85A后，转化至大肠

【作者】

：

邓毛子石春薇王芳付瑞玲王春方正明范雄林

【机构】

：

华中科技大学同济医学院病原生物学系,咸宁学院基础医学院

【出处】

：

基础医学与临床

【发表日期】

：

2010年2期

【关键词】

：

结核分枝杆菌 AG85A 原核表达纯化免疫反应性 Mycobacterium tuberculosis Ag85A prokaryotic expressi

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目的通过原核表达获得结核分枝杆菌Ag85A蛋白。方法用PCR从结核分枝杆菌H37Rv菌株中扩增出编码Ag85A的拍刚基因，克隆入原核表达载体pProEXHTb，产生重组质粒pPro85A后，转化至大肠杆菌感受态细胞BL21并诱导大量表达。用镍纯化系统纯化重组Ag85A蛋白，用不同分枝杆菌感染的小鼠血清通过ELISA确定其免疫反应性。利用PCR技术鉴定脚A基因在不同分枝杆菌的分布。结果32ku的Ag85A蛋白获得高效表达和纯化。表达Ag85A蛋白的fopA基因在结核分枝杆菌H37Rv、H37Ra、BCG、草

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