【摘 要】
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目的:构建人肝再生增强因子原核融合表达载体,并对表达产物进行生物活性研究,从而为hALR基因修饰的肝细胞移植的细胞来源研究提供实验依据,并为人肝再生增强因子的临床应用奠
【机 构】
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中南大学湘雅医院,广东省佛山第一人民医院,卫生部肝胆肠研究中心
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)
论文部分内容阅读
目的:构建人肝再生增强因子原核融合表达载体,并对表达产物进行生物活性研究,从而为hALR基因修饰的肝细胞移植的细胞来源研究提供实验依据,并为人肝再生增强因子的临床应用奠定基础.方法:以pGEM-T-hALR为模板,应用PCR技术扩增出hALRcDNA,克隆入原核融合表达载体pGEX-4T-2,限制性内切酶酶切及测序证实序列正确;转化大肠杆菌JM109:挑取阳性克隆以IPTG诱导表达融合蛋白GST-hALR,融合蛋白通过谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析纯化后进行凝血酶酶切获得hALR单体;采用3H-
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