【摘 要】
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目的 探讨壬二酸对阿霉素诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法 取生长融合度达80%以上的H9c2心肌细胞随机分为正常组、模型组、壬二酸组，正常组以高糖DMEM培养基培养，模型组以5μmol/L阿霉素处理24 h,壬二酸组以10μmol/L壬二酸和5μmol/L阿霉素共处理24 h,采用CCK-8法和微量酶标法检测心肌细胞活力及乳酸脱氢酶（LDH）漏出量，采用化学荧光法检测细胞内活性氧（ROS
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（32000830）；
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目的 探讨壬二酸对阿霉素诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法 取生长融合度达80%以上的H9c2心肌细胞随机分为正常组、模型组、壬二酸组，正常组以高糖DMEM培养基培养，模型组以5μmol/L阿霉素处理24 h,壬二酸组以10μmol/L壬二酸和5μmol/L阿霉素共处理24 h,采用CCK-8法和微量酶标法检测心肌细胞活力及乳酸脱氢酶（LDH）漏出量，采用化学荧光法检测细胞内活性氧（ROS）水平及线粒体膜电位（ΔΨm）变化，采用荧光素酶法检测H9c2心肌细胞内三磷酸腺苷（ATP）水平，采用透射电子显微镜观察H9c2心肌细胞中自噬体的数量，采用免疫荧光染色分析细胞中Bcl-2/腺病毒E1B相互作用蛋白3（BNIP3）与线粒体荧光探针（Mitotracker）共定位的情况，采用Western blot实验检测H9c2心肌细胞中自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3-Ⅰ（LC3-Ⅰ）、LC3-Ⅱ、泛素结合蛋白（P62）、凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子（Bad）及BNIP3的表达水平。24只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组（仅第1天腹腔注射阿霉素10 mg/kg）、壬二酸组（在模型组处理基础上壬二酸20 mg/kg连续灌胃7 d）,每组8只小鼠，采用超声心电图检测小鼠心功能的变化，采用Masson染色法检测小鼠心脏组织中心肌纤维化的情况。结果 两组细胞LDH漏出量、ROS水平、ATP含量、ΔΨm、BNIP3与Mitotracker的Pearson系数、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及Bad、BNIP3、P62蛋白表达水平与模型组比较，差异均具有显著性（t=2.54～17.37,P＜0.05）。正常组、壬二酸组小鼠与模型组小鼠比较，EF%、FS%差异均具有显著性（t=3.41～6.49,P＜0.05）。结论 壬二酸对阿霉素诱导的心肌细胞损伤具有保护作用，其作用可能是通过抑制细胞中BNIP3介导的线粒体自噬实现的。
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