【摘 要】
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目的 探索以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组质粒pEGFP/SDF-1a/54/KDEL电穿孔悬浮培养的Molt-4细胞的高效转染条件.方法 通过控制脉冲幅度、脉冲电压、细胞生长状态等三个主要条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将转入悬浮培养的Molt-4,用荧光显微镜和流式细胞仪观察转染率.结果 传代后第二天的Molt-4细胞在260 V、950 μF得到最大转染率51.2%.荧光显微镜下可
【机 构】
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510006,广州,广东药学院基础学院,510006,广州,广东药学院基础学院,510632,广州,暨南大学药学院
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目的 探索以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组质粒pEGFP/SDF-1a/54/KDEL电穿孔悬浮培养的Molt-4细胞的高效转染条件.方法 通过控制脉冲幅度、脉冲电压、细胞生长状态等三个主要条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将转入悬浮培养的Molt-4,用荧光显微镜和流式细胞仪观察转染率.结果 传代后第二天的Molt-4细胞在260 V、950 μF得到最大转染率51.2%.荧光显微镜下可观察到被转染目的基因的细胞发出绿色荧光.结论 优选260V、950μF和良好的细胞生长状态等条件下的Molt-4,可获得目的基因SDF-1a/54/KDEL的最高转染效率。
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