观察食管鳞癌细胞株中Krüppel样因子4(KLF4)启动子区甲基化水平对其表达及对顺铂耐药性的影响。
方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测7种食管鳞癌细胞株中KLF4甲基化及表达水平，筛选KLF4高甲基化及低甲基化水平细胞株(TE1及KYSE140)。不同顺铂浓度下，使用噻唑蓝(MTT)法检测不同细胞株的增殖活性，使用流式细胞仪检测不同细胞株细胞凋亡及细胞周期。
结果细胞株CAES17、EC109、KYSE140、KYSE70和KYSE30中KLF4相对高表达，其启动子区呈低甲基化，细胞株TE1和KYSE510中KLF4相对低表达，其启动子区高甲基化。使用5-Aza-CdR去除其甲基化可恢复TE1细胞株KLF4表达。MTT法示，在顺铂终质量浓度为0.5、1.0、5.0、10.0 mg/L时，使用5-Aza-CdR处理TE1后细胞抑制率均增加(t＝5.053，P＝0.007；t＝3.792，P＝0.019；t＝5.119，P＝0.007；t＝7.213，P＝0.002)，KYSE140细胞抑制率高于TE1(t＝6.156，P＝0.004；t＝5.463，P＝0.005；t＝10.211，P＝0.001；t＝13.278，P＝0.000)。流式细胞仪检测示，顺铂终质量浓度为1.0 mg/L时，使用5-Aza-CdR处理TE1前后差异无统计学意义[(6.2±0.9)%比(7.0±0.7)%，P＝0.290]，TE1细胞株凋亡率低于KYSE140细胞株凋亡率[(6.2±0.9)%比(9.1±1.5)%，P＝0.045]。顺铂终质量浓度5.0 mg/L及10.0 mg/L时，使用5-Aza-CdR处理TE1后细胞凋亡率均增加(t＝7.838，P＝0.001；t＝5.196，P＝0.007)。同时，顺铂终质量浓度5.0 mg/L及10.0 mg/L时，KYSE140细胞株的死亡率高于TE1细胞株(t＝4.260，P＝0.013；t＝10.535，P＝0.000)。顺铂终质量浓度0.1 mg/L和0.5 mg/L时，经5-Aza-CdR处理后TE1细胞株和KYSE140细胞株均与TE1细胞株在S期细胞比例上差异有统计学意义。
结论食管鳞癌细胞株中KLF4启动子区甲基化抑制表达，顺铂作用下，KLF4高表达可增加食管鳞癌细胞株对顺铂敏感性，使细胞周期阻滞在S期。