【摘 要】
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[目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pG
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室,中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疾病病原生物学国家重点开放实验室
【基金项目】
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国家科技支撑计划（2006BAD06A14）, 转基因重大专项（2008ZX08011-004）
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[目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS表达菌株,经IPTG诱导表达,以实现VP1蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并对2种载体重组菌进行超声裂解,取上清和沉淀电泳,用金属螯合亲合层析法对His-VP1进行纯化。[结果]SDS-PAGE电泳分析显示pPRO-V
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