【摘 要】
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目的 建立一种简便、有效的西藏小型猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养及纯化方法,并基于BMSCs建立慢病毒介导的外源基因EGFP体外投递系统.方法 密度梯度离心法分离西藏
【机 构】
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南方医科大学比较医学研究所暨实验动物中心,广州医学院第二附属医院肾移植科,南方医科大学肿瘤研究所
【基金项目】
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广东省医学科学研究基金;广东省科技计划项目;南方医科大学优秀中青年科技人才库科研资助金;广东省科技计划项目;广东省科研条件建设项目;广东省科技计划项目;广州地区科学仪器协作共用网专用基金
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目的 建立一种简便、有效的西藏小型猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养及纯化方法,并基于BMSCs建立慢病毒介导的外源基因EGFP体外投递系统.方法 密度梯度离心法分离西藏小型猪BMSCs,差速贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测第3代BMSCs CD45、CD90和CD105表达；此外,用携带EGFP基因的慢病毒转染BMSCs以获得EGFP标记的BMSCs,倒置荧光显微镜下观察感染情况及流式细胞术检测感染效率.结果 ①密度梯度分离法结合差速贴壁法所获得的细胞经鉴定符合MSCs的特性.②借助慢病毒高效率将EGFP导入BMSCs,感染效率为84.1％.结论 利用密度梯度分离法结合差速贴壁法可获得高纯度的BMSCs,基于BMSCs 建立了慢病毒介导的外源基因体外投递系统.
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