【摘 要】
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目的 在前期研究的基础上进一步验证miR-148a-3p通过促凋亡蛋白Bim对银屑病发病机制中T细胞亚群分化的影响及相关免疫应答机制的调控.方法 培养人T淋巴白血病(Jurkat)细胞;Bi
【机 构】
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广州市皮肤病防治所,广东广州,510095;广东省第二人民医院,广东广州,510317
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目的 在前期研究的基础上进一步验证miR-148a-3p通过促凋亡蛋白Bim对银屑病发病机制中T细胞亚群分化的影响及相关免疫应答机制的调控.方法 培养人T淋巴白血病(Jurkat)细胞;Bim siRNA、miR-148a-3p mimics、miR-148a-3p inhibitor,分别电转CD4+T细胞,RT-qPCR检测miR-148a-3p和Bim mRNA,Western blot检测Bim蛋白;通过ELISA检测培养上清中细胞因子含量.结果 Bim siRNA、miR-148a-3p mimics、miR-148a-3p inhibitor分别电转CD4+T细胞(Jurkat细胞),电转效率可达84.5％.与空白组相比,过表达的miR-148a-3p可有效抑制靶基因Bim mRNA及其蛋白的表达,ELISA检测培养上清中IFN-γ及IL-17均明显升高,IL-4及IL-10均明显降低(P均＜0.05);而抑制miR-148a-3p时Bim mRNA及其蛋白的表达升高,IFN-γ明显减少(P均＜0.05),而IL-17表达(P＞0.05)下降不明显,IL-4及IL-10均明显升高(P均＜0.05).在正常CD4+T细胞中沉默Bim的表达,IFN-γ及IL-17亦显著升高(P均＜0.05).结论 在银屑病患者中高表达的miR-148a-3p靶向调控Bim的表达可导致Th1、Th17细胞异常活化,Th2细胞数量减少及Treg细胞免疫抑制功能减弱,这提示miR-148a-3p参与寻常性银屑病病情的发生发展,为后续miR-148a-3p靶向干预寻常性银屑病病情提供了依据.
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