慢性粒细胞白血病特异性单、双及三单位核酶载体的构建

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chunhuac
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文拟针对在慢性粒细胞白血病发病中起关键作用的bcrabl 融合基因, 构建特异性的系列核酶载体。为此,我们针对bcrabl 融合位点设计、合成了3 个相邻的锤头状核酶。通过基因重组将3 个单核酶按顺序定向克隆入改建的pGEM3zf 载体中,构建了bcrabl 单核酶、双核酶及三核酶体外转录载体, 并在此基础上将三单位核酶克隆入p DoRneo 载体中构建三核酶逆转录病毒载体。此外, 通过PCR 方法, 扩增了bcrabl 融合位点附近约376bp 的序列,成功地构建了bcrabl 融合基因体外转录载体。本文构建的bcrabl 特异性系列载体,为今后遴选特异、高效的核酶打下了基础,并为将核酶用于自体骨髓移植的体外骨髓净化创造了条件。 This article aims to build a specific series of ribozyme vectors for the bcrabl fusion gene that plays a key role in the pathogenesis of chronic myeloid leukemia. For this purpose, we designed and synthesized three adjacent hammerhead ribozymes for the bcr-abl fusion site. Three single-ribosomal enzymes were cloned into the reconstructed pGEM-3zf vector by gene recombination, and bcrabl single-ribozyme, dual-ribozyme and tri-nuclease in vitro transcription vectors were constructed, and on this basis, three units of nuclear were constructed. The enzyme was cloned into the pDoRneo vector to construct a trinuclease retroviral vector. In addition, the 376 bp sequence near the bcrabl fusion site was amplified by PCR and the bcrabl fusion gene in vitro transcriptional vector was successfully constructed. The bcrabl specific vector constructed in this study lays the foundation for the selection of specific and efficient ribozymes in the future, and creates conditions for the in vitro bone marrow purification using ribozymes for autologous bone marrow transplantation.
其他文献
绞盘用摩擦片静片,工作条件苛刻,要求材料具有较高的摩擦系数,热稳定性和较好的耐磨性。过去采用石棉塑料或纸质材料生产,存在易于烧焦、碎裂而严重磨损的问题,因此,决定选
随着全国首家村镇银行——四川仪陇惠民村镇银行正式开业,各地贷款公司、资金互助社等新机构也纷纷成立。据悉,将还有更多的金融机构、企业和个人希望进入农村金融市场。2007
目的:了解纤维支气管镜(纤支镜)对肺癌的检出率及镜下特征,以探讨其诊断价值。方法:回顾分析1983年~1997年的1416例纤支镜检查结果。结果:经纤维支气管镜检查和(或)活检,病理证实的肺癌416例,占同期支气
在近代的铝生产工业中,电解槽容易趋于大型化,目前世界上最大的铝电解槽的容量为225千安,最大试验槽的容量已达280千安。采用大容量铝电解槽生产铝时,所遇到的重要技术问题
石家庄钢铁厂150m~3高炉煤气干式布袋除尘工程已顺利通过省级验收鉴定,至此,这个厂的高炉煤气全部实现了干式除尘。高炉煤气由湿法除尘发展到干式布袋除尘,这是炼铁工艺流程
我们于199102~199702对26例海绵状血管瘤采用直流电形成血栓法治疗,取得了满意效果。1 临床资料1.1 一般资料 女16例,男10例,年龄9~53岁,病程最短2年,最长14年。有手术史未彻底切除者2例,其余24例,有硬化剂注射
一、缘起哈佛大学世界文学研究所(Institute for World Literature,下略为IWL)的2014年暑期学校项目,于6月22日至7月18日由香港城市大学主办。本次暑校,一共有来自28个国家/
患者女性,61岁。1988年1月曾行“左腰骶棘肌肿瘤”手术,术后病理诊断左腰骶棘肌多形性横纹肌肉瘤。1990年2月因左肩背肿物再次入院手术,术后病理诊断左肩背横纹肌肉瘤转移。两次均用环磷酰胺
以亚砷酸10mg/d加5%葡萄糖500mL静脉滴注,28~56天为1疗程。治疗25例急性复发性早幼粒白血病。治疗中每周1次或至评价疗效时进行骨髓检查,每周2次以上血常规检查,并监测凝血、纤溶指标,肝、肾功能等。细胞