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建立了免疫亲和柱净化／高效液相色谱法测定乳粉中维生素B_12的方法。采用磷酸盐缓冲液溶解样品后，通过维生素B12免疫亲和柱、甲醇洗脱、浓缩富集后直接测定。采用Symmstry C_18色谱柱为分析柱，柱温为35℃，流动相为0.03 mol／L磷酸二氢钾（磷酸调至pH3.0）-乙腈（85：15），流速为1.0mL／min，紫外检测器波长为361 nm。在优化条件下，维生素B_12在20～300μg／L范围内呈良好线性关系，相关系数（r）为0．9997，检出限为0．6μg／kg；样品的加标回收率为90％～96