【摘 要】
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提出了一种高效、低成本的两阶段生产D-阿洛酮糖的生产工艺.第一阶段,构建异源表达Flavonifrac-tor plautii D-阿洛酮糖3-差向异构酶的重组大肠杆菌用于转化果糖,实现D-阿洛酮糖的全细胞生物合成.重组大肠杆菌在pH 7.5、65℃条件下反应最优,且在不添加金属离子、60℃反应条件下半衰期达到2.7 h,具有高热稳定性.在添加干重2.4 g/L重组大肠杆菌的D-果糖纯水溶液中,产物D-阿洛酮糖的终质量浓度为231 g/L,转化率达到33％.在添加硼酸根离子的条件下,D-阿洛酮糖的终质量浓
【机 构】
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大连理工大学 生物工程学院,辽宁 大连,116024;大连医诺生物股份有限公司,辽宁 大连,116600
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提出了一种高效、低成本的两阶段生产D-阿洛酮糖的生产工艺.第一阶段,构建异源表达Flavonifrac-tor plautii D-阿洛酮糖3-差向异构酶的重组大肠杆菌用于转化果糖,实现D-阿洛酮糖的全细胞生物合成.重组大肠杆菌在pH 7.5、65℃条件下反应最优,且在不添加金属离子、60℃反应条件下半衰期达到2.7 h,具有高热稳定性.在添加干重2.4 g/L重组大肠杆菌的D-果糖纯水溶液中,产物D-阿洛酮糖的终质量浓度为231 g/L,转化率达到33％.在添加硼酸根离子的条件下,D-阿洛酮糖的终质量浓度为378 g/L,转化率可以达到63％.在第二阶段,利用马克斯克鲁维酵母消耗混合体系中的D-果糖生产乙醇,降低分离成本.在不添加任何营养物质的情况下,在2种不同体系内,D-果糖均可以完全被消耗并产出约0.4 g/g的乙醇.该文研究结果为D-阿洛酮糖的低成本工业化生产奠定了良好的基础.
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