SARS冠状病毒核衣壳蛋白在酵母中的表达与活性检测

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong541
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用PCR扩增SARS冠状病毒N蛋白全长cDNA,克隆到酵母表达载体pPIC3.5K,构建pPIC3.5K-SCoVN酵母表达质粒.表达质粒线性化后电转化到毕赤酵母GS115中,经G418-RDB,MM/MD平板与PCR扩增筛选获得His+Mut+重组菌株.比较研究了不同的培养基、溶解氧以及甲醇浓度对菌株生长与重组蛋白表达的影响.结果表明:FBS培养基最适宜重组菌的生长与表达,溶氧对菌体的生长与表达有显著的影响,甲醇诱导最佳终浓度为1%(V/V),SDS-PAGE分析重组蛋白的表达量,发现重组N蛋白表达量占
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