【摘 要】
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目的建立一种能同时分析甲基化和单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)的新方法。方法以印记SNPrs220028(A/G)为例,基因组DNA经甲基化敏感限制酶消化后用片段长
【机 构】
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华中科技大学同济医学院法医学系; 华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系; 华中科技大学同济医学院法医学系 430030武汉; 430030武汉;
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目的建立一种能同时分析甲基化和单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)的新方法。方法以印记SNPrs220028(A/G)为例,基因组DNA经甲基化敏感限制酶消化后用片段长度差异等位基因特异性PCR(fragmentlengthdiscrepantallele-specificPCR,FLDAS-PCR)分型;用扩增产物酶消化法来排除酶切位点序列变异,证实检出的是甲基化等位基因。结果消化后FLDAS-PCR可选择性检出甲基化等位基因,家系分析表明其来自母亲。等位基因频率A=0.5085,G=0.4915,多态信息含量为0.3749。结论消化后FLDAS-PCR技术可以实现甲基化和SNP的复合分析;印记SNPrs220028在Prader-Willi/Angelman综合征诊断中有潜在意义。
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