EGFR单克隆抗体影响结肠癌细胞生物学行为的实验研究

来源 :中国癌症杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuyan425
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背景与目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在多种实体肿瘤中存在过表达。本研究旨在探讨EGFR单克隆抗体西妥昔单抗(cetuximab)对体外培养的人结肠癌细胞株HT29增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:不同浓度EGFR单克隆抗体(12.5、25、50、100μg/mL)作用于对数生长期的HT29细胞,倒置显微镜下观察细胞生长情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察EGFR单克隆抗体对HT29细胞生长的抑制作用;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测对细胞周期和细胞凋亡的影响;免疫细胞化学(SP)法测定细胞内Bcl-2、Caspase-3蛋白表达变化。结果:MTT比色法显示不同浓度的EGFR单克隆抗体可抑制HT29细胞增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性,试验组与对照组及各试验组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。FCM检测显示,HT29经EGFR单克隆抗体作用48 h后细胞周期有明显变化,G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,呈浓度依赖性(P<0.05),细胞凋亡率与EGFR单克隆抗体浓度呈正相关。SP法显示,HT29细胞Caspase-3蛋白随EGFR单克隆抗体浓度增加而表达增加,Bcl-2蛋白随药物浓度增加表达下降(P<0.05)。结论:EGFR单克隆抗体可抑制人结肠癌细胞HT29增殖,诱导细胞凋亡,其作用可能与上调Caspase-3蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达有关。
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