构建果糖-1，6-二磷酸酶1（FBP1）重组腺病毒，并探究FBP1对肝癌细胞（HepG2）自噬及增殖的影响。
方法PCR扩增FBP1 cDNA序列并克隆到腺病毒载体pAdTrack-TO4，构建重组腺病毒质粒pAdTrack-FBP1，将重组腺病毒质粒用Lipofectamine3000转染至HEK293细胞中，包装、扩增获得高滴度重组腺病毒AdFBP1。用重组腺病毒AdFBP1感染HepG2细胞，同时设置Mock组和AdGFP组。通过Western blot技术和激光共聚焦技术观察FBP1对肝癌细胞自噬水平的影响，进一步通过克隆形成实验和MTS实验观察FBP1对肝癌细胞增殖能力的影响。组间均数比较采用t检验、单因素方差分析。
结果成功构建高滴度重组腺病毒FBP1。Western blot和激光共聚焦检测结果显示，与AdGFP组相比，AdFBP1组自噬水平明显降低。Western blot结果表明，AdGFP组的LC3Ⅱ蛋白相对表达水平为1.10±0.10，AdFBP1组的为0.30±0.01，F = 90.36，P < 0.01。激光共聚焦结果表明，AdGFP组肝癌细胞的平均自噬体数量为（28.33±1.53）个，AdFBP1组的为（12.33±1.53）个，F = 97.40，P < 0.01。另外，克隆形成实验和MTS实验结果显示，与AdGFP组相比，AdFBP1组肝癌细胞的增殖明显受到抑制。克隆形成实验结果表明，AdGFP组的细胞克隆为（65.66±2.57）个，AdFBP1组的细胞克隆为（34.00±2.00）个，F = 141.50，P < 0.01。MTS实验结果表明，AdGFP组96 h的吸光度值为39.13±2.21，AdFBP1组在96 h的吸光度值为30.61±3.33，F = 7.80，P < 0.05。
结论FBP1抑制肝癌细胞HepG2的自噬及增殖。